Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano SIGLEC9 para Citometria de Fluxo - Q9Y336

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da SIGLEC9

• A lectina 9 do tipo Ig de ligação ao ácido siálico (SIGLEC9, também conhecida como CD329 ou FOAP-9) é uma molécula de adesão putativa que medeia a ligação dependente de ácido siálico às células, reconhecendo preferencialmente o ácido siálico ligado em α-2,3 ou α-2,6.
• O sítio de ligação ao ligante pode ficar mascarado em cis por interações com ácidos siálicos na mesma superfície celular, modulando potencialmente a adesão celular e a sinalização.
• A SIGLEC9 é membro da superfamília das imunoglobulinas e contém um domínio V-tipo semelhante ao Ig e dois domínios C2-tipo semelhantes ao Ig, uma característica da família das lectinas de ligação ao ácido siálico.
• Ela é expressa em leucócitos do sangue periférico, notavelmente em neutrófilos e monócitos, mas não em eosinófilos; também encontrada no fígado, fígado fetal, medula óssea, placenta, baço e em níveis mais baixos em muitos outros tecidos.
• A proteína é uma proteína de membrana de tipo I de passagem única, com uma região extracelular que contém o sítio de reconhecimento do ácido siálico e uma cauda citoplasmática que pode participar da sinalização inibitória.
• As modificações pós-tradução incluem glicosilação N-ligada e formação de pontes dissulfeto, que são essenciais para a estabilidade estrutural e a função.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, e a proteína está sujeita a clivagem proteolítica, que pode regular sua expressão superficial e gerar SIGLEC9 solúvel.
• Como lectina, a SIGLEC9 está envolvida nas interações célula-célula e na modulação imunológica, e sua desregulação está implicada em condições inflamatórias e autoimunes.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi desenvolvido contra uma proteína recombinante correspondente ao domínio extracelular (aminoácidos 18-348) da SIGLEC9 humana; espera-se que ele reconheça a forma nativa do proteína expressa na superfície.
• Para citometria de fluxo, considere titular o anticorpo para determinar a concentração de coloração ideal para o seu tipo de célula e condições de ensaio, pois o excesso de anticorpo pode aumentar o ruído de fundo ou afetar a relação sinal-ruído.
• Devido ao possível mascaramento cis de epítopos da SIGLEC9 por ácidos siálicos na superfície celular, a dessialilação enzimática (por exemplo, tratamento com neuraminidase) pode ser testada para aumentar a ligação do anticorpo em certas configurações experimentais; no entanto, valide primeiro no sistema de amostra relevante.
• Como a SIGLEC9 é expressa predominantemente em neutrófilos e monócitos, inclua estratégias de gating adequadas e marcadores de linhagem para confirmar a especificidade em populações mistas de leucócitos.
• A compensação de fluorescência é necessária ao usar em combinação com outros fluoróforos; use controles de coloração única para definir as matrizes de compensação com precisão.

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