Anticorpo Monoclonal de Coelho anti-Humano T-bet/Tbx21 para Citometria de Fluxo Intracelular - Q9UL17

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do T-bet/Tbx21

• O T-bet (TBX21) é o fator de transcrição principal para o compromisso da linhagem de células Th1, iniciando o desenvolvimento Th1 ao ativar programas genéticos específicos de Th1 e reprimir simultaneamente programas genéticos de Th2 e Th17. Referências relacionadas: PMID:10761931

• Ele ativa diretamente a expressão dos genes IFNG e CXCR3 através do recrutamento de complexos de remodelação da cromatina, incluindo KDM6B e SWI/SNF contendo SMARCA4, que estabelecem uma topologia de cromatina permissiva. Referências relacionadas: PMID:33296702

• O T-bet recruta o complexo de superalongação (SEC) contendo CDK9 e ciclina T1 para super-intensificadores (super-enhancers), promovendo o alongamento transcricional de genes associados ao Th1. Referências relacionadas: PMID:27292648

• Suprime destinos alternativos de células T auxiliares: bloqueia a diferenciação Th17 ao inibir a ativação mediada por RUNX1 de RORC e reprime citocinas Th2 (IL-4, IL-5, IL-13) através da regulação negativa de GATA3 e NFATC2.

• O T-bet protege as células Th1 de amplificar respostas aberrantes de interferão do tipo I em ambientes ricos em IFN-gama, atuando como um repressor de fatores de transcrição de IFN do tipo I e ISGs.

• É necessário para o desenvolvimento adequado das células natural killer (NK) e das células T invariáveis associadas às mucosas (MAIT). Referências relacionadas: PMID:33296702

• O T-bet localiza-se no núcleo e sofre modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e ubiquitinação, que regulam a sua atividade.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para a coloração intracelular deste alvo nuclear, certifique-se de um protocolo robusto de fixação e permeabilização otimizado para fatores de transcrição. Considere testar diferentes tampões de permeabilização para equilibrar a acessibilidade do epítopo e a preservação da morfologia.
• Titule o anticorpo para determinar a concentração ideal para o seu tipo de célula específico e condições experimentais; inclua um controlo de isótipo apropriado e um controlo de fluorescência menos um (FMO) para avaliar o fundo.
• O imunogénio corresponde à região C-terminal (aa 322–535) do T-bet humano, o que pode auxiliar na deteção tanto da forma completa quanto de variantes de splicing potenciais, mas a reatividade cruzada com outros membros da família T-box deve ser verificada no seu sistema de ensaio.

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