Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-Humano TIM-3/HAVCR2 para Citometria de Fluxo - Q8TDQ0

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TIM-3/HAVCR2

• Identidade proteica e isoformas: O receptor celular 2 do vírus da hepatite A (HAVCR2), também conhecido como proteína 3 contendo domínio de imunoglobulina e mucina de células T (TIM-3), é uma glicoproteína transmembrana tipo I pertencente à família TIM de receptores imunomoduladores.
• Checkpoint imunológico inibitório central: O TIM-3 funciona principalmente como um receptor co-inibitório que atenua as respostas das células T, promovendo tolerância imunológica e suprimindo respostas autoimunes e aloimunes mediadas por Th1. Referências relacionadas: PMID:14556005
• Regulação da sinalização de células T: Em células CD8+, o TIM-3 inibe as atividades do NF-kB e NFAT induzidas pelo TCR, reduzindo a secreção de IL-2, possivelmente através da associação com LCK e recrutamento de PTPRC para a sinapse imunológica. Referências relacionadas: PMID:24337741 PMID:26492563
• Interações com ligantes: O TIM-3 liga-se à galectina-9 (LGALS9) e à fosfatidilserina (PtSer), mediando supressão imunológica, apoptose de células Th1 e fagocitose de células apoptóticas. No entanto, a relevância funcional da ligação à LGALS9 tem sido debatida. Referências relacionadas: PMID:16286920 PMID:24337741 PMID:23555261
• Modulação imunológica inata: Expresso em macrófagos, células dendríticas e células NK, o TIM-3 regula respostas inatas, incluindo ativação de macrófagos e citotoxicidade de células NK. Referências relacionadas: PMID:11823861 PMID:22323453 PMID:22383801
• Padrão de expressão tecidual: O TIM-3 é predominantemente expresso em células Th1, células T reguladoras (Treg), células dendríticas e células natural killer (NK). Sua expressão é regulada positivamente em infecções crônicas como HCV e HIV, contribuindo para a exaustão das células T.
• Localização subcelular e topologia: Localizado na membrana celular e concentrado nas junções celulares, apresentando um domínio de imunoglobulina extracelular, uma hélice transmembrana e uma cauda citoplasmática com resíduos de tirosina conservados.
• Modificações pós‑traducionais: A proteína sofre glicosilação ligada a N, palmitoilação e fosforilação. Ligações dissulfeto estabilizam o domínio Ig, e a ubiquitinação pode regular o turnover.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio corresponde ao domínio extracelular (aa 22–200) do TIM-3 humano, garantindo o reconhecimento do receptor nativo. Considere o uso de proteína TIM-3 recombinante ou células transfectadas com TIM-3 como controles positivos.
• Para citometria de fluxo, faça titulação do anticorpo de 0,1 a 1,0 µg por milhão de células e inclua controles isotípicos apropriados. Valide a coloração em células T humanas ativadas (por exemplo, PBMCs estimuladas com anti‑CD3/CD28), onde o TIM-3 é regulado positivamente.
• Este anticorpo conjugado simplifica a detecção direta, minimizando o fundo inespecífico de reagentes secundários. Use em painéis multicolor com compensação cuidadosa, particularmente ao combinar com outros fluoróforos de 488 nm.
• Confirme a viabilidade das células do substrato e evite protocolos de fixação que mascarem o epítopo; recomenda-se coloração de células vivas.

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