Anticorpo Monoclonal Coelhinho Anti-TNF-α Humano para Citometria de Fluxo (Intracelular) - P01375

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TNF-α

• O fator de necrose tumoral (TNF-α), também conhecido como catectina e TNFSF2, é uma citocina de 26 kDa codificada pelo gene TNF no cromossomo 6p21.3.

• Secretado principalmente por macrófagos, o TNF-α funciona como um potente pirogênio endógeno, induzindo febre diretamente e via IL-1, e é um mediador chave da caquexia na inflamação crônica e no câncer.

• Ele se liga a TNFRSF1A/TNFR1 e TNFRSF1B/TNFBR, desencadeando cascatas de sinalização que regulam a sobrevivência celular, apoptose e diferenciação em uma ampla gama de tipos celulares.

• A citocina é sintetizada como uma proteína transmembrana do tipo II; seu ectodomínio solúvel é liberado pela TACE/ADAM17, permitindo atividades tanto justácrina locais quanto endócrinas sistêmicas.

• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação, formação de ligações dissulfeto, miristoilação e fosforilação, que são críticas para o correto dobramento, tráfego e ligação ao receptor.

• Na artrite reumatoide, o TNF-α promove inflamação autoimune ao prejudicar a função das células T reguladoras (Treg) por meio da desfosforilação mediada por PP1 e inativação do fator de transcrição FOXP3 (PubMed:23396208).

  Referências relacionadas: PMID:23396208

• O TNF-α contribui para a imunidade anticâncer ao mediar a citotoxicidade dependente de neutrófilos contra células de câncer de bexiga em combinação com drogas miméticas de SMAC (PubMed:16829952, PubMed:22517918).

  Referências relacionadas: PMID:16829952, PMID:22517918

• Ele induz sinergicamente a produção de VEGF com IL-1β e IL-6 para promover angiogênese (PubMed:12794819) e estimula a osteoclastogênese, impulsionando a destruição óssea em doenças inflamatórias (Por similaridade).

  Referências relacionadas: PMID:12794819

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como o imunogênio abrange o domínio extracelular (aminoácidos 77-233), espera-se que o anticorpo reconheça tanto as formas ligadas à membrana quanto as solúveis do TNF-α.
• Para citometria de fluxo intracelular, garanta protocolos adequados de permeabilização e fixação para permitir o acesso ao TNF-α citoplasmático; considere usar um controle positivo conhecido, como monócitos ativados.
• Valide o anticorpo no sistema de amostra relevante; sangue total humano ou PBMCs estimulados com LPS podem ser usados para induzir a expressão de TNF-α para coloração intracelular.
• Como o TNF-α é secretado, um inibidor de transporte de proteínas (por exemplo, brefeldina A ou monensina) é recomendado durante a estimulação celular para acumular a proteína intracelular.
• Tome cuidado para evitar ligação inespecífica titulando o anticorpo e usando controles de isotipo apropriados.

CamelBio: Sua Ponte de Abastecimento Completa

A CamelBio fornece aos fabricantes de diagnósticos, laboratórios e institutos de pesquisa acesso completo a matérias-primas para IVD, do conceito à clínica. Para pesquisa em imunooncologia e inflamação relacionada ao TNF-α, fornecemos pares de anticorpos validados, anticorpos monoclonais/policlonais otimizados, reagentes auxiliares a granel e podemos fornecer alvos raros para apoiar o desenvolvimento do seu ensaio. Entre em contato conosco para otimizar seu processo de aquisição e acelerar o cronograma do seu projeto.