mAb coelho anti-β2 Microglobulina Humana para Citometria de Fluxo - P61769

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da β2 Microglobulina

• A beta-2-microglobulina (B2M) é uma proteína não glicosilada de 13 kDa que atua como cadeia leve invariante das moléculas de MHC de classe I, sendo essencial para a apresentação de antígenos a linfócitos T citotóxicos.
• Como membro da superfamília das imunoglobulinas, a B2M contém um domínio semelhante a imunoglobulina e está associada de forma não covalente à cadeia alfa do MHC I na superfície celular.
• A B2M é sintetizada como uma pré-proteína, processada para a forma madura após clivagem do peptídeo sinal e é expressa constitutivamente em diversos tecidos, refletindo seu papel fundamental na vigilância imunológica.
• Subcelularmente, a B2M está predominantemente localizada na superfície celular como parte do complexo MHC I e também é encontrada na forma secretada em fluidos corporais.
• A proteína sofre modificações pós-tradução, incluindo glicação, formação de pontes dissulfeto e formação de ácido pirrolidona carboxílico no terminal N, que são importantes para sua estabilidade e função.
• A proteína exógena EsxA ou EsxA-EsxB de Mycobacterium tuberculosis se liga à B2M e impede sua exportação para a superfície celular, potencialmente comprometendo a apresentação de antígenos de classe I, o que pode representar um mecanismo de evasão imunológica. Referências relacionadas: PMID:25356553
• Mutações no gene B2M estão associadas à amiloidose e outras doenças, destacando sua importância clínica em distúrbios de agregação proteica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi gerado contra um imunógeno recombinante que compreende os aminoácidos 21-119 da B2M humana, englobando o domínio extracelular maduro; portanto, ele provavelmente reconhece a conformação nativa em células vivas, sendo adequado para citometria de fluxo.
• Para a análise por citometria de fluxo da β2-microglobulina de superfície celular, recomendamos o uso deste conjugado diretamente diluído em tampão apropriado; pode ser utilizado um protocolo padrão de coloração para células mononucleares de sangue periférico humano ou linhas celulares de linfócitos.
• Valide a concentração ideal do anticorpo por titulação no sistema experimental relevante e inclua controles de isotipo apropriados para garantir a especificidade.
• Como a B2M é um fator solúvel, sobrenadantes ou plasma podem ser analisados por meio de ensaios de fluxo baseados em esferas; no entanto, o desempenho deste anticorpo em tais ensaios não foi testado especificamente.

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