Anticorpo monoclonal de coelho anti-CD14 humano/macaco para FC - P08571

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do CD14

• CD14 (antígeno CD14 de diferenciação de monócitos, My23) é uma glicoproteína ancorada por glicosilfosfatidilinositol (GPI), pertencente à superfamília de repetições ricas em leucina (LRR).
• Atua como correceptor do lipopolissacarídeo bacteriano (LPS), ligando-se ao LPS monomérico em conjunto com a LBP e entregando-o ao complexo TLR4/MD-2 para desencadear a ativação da imunidade inata. Referências relacionadas: PMID:1698311, PMID:20133493, PMID:22265692, PMID:23264655
• A sinalização a jusante é mediada por MyD88, TIRAP e TRAF6, levando à ativação de NF-κB e à secreção de citocinas pró-inflamatórias. Referências relacionadas: PMID:8612135
• CD14 também atua como correceptor dos heterodímeros TLR2/TLR1 e TLR2/TLR6, reconhecendo lipopeptídeos triacilados e diacilados, respectivamente, e transmitindo sinais a partir da superfície celular, seguido de direcionamento ao Golgi por uma via dependente de jangadas lipídicas. Referências relacionadas: PMID:16880211
• Liga-se à LDL eletronegativa (LDL(-)) e medeia a liberação de citocinas induzida por LDL modificada, conectando o metabolismo lipídico às respostas inflamatórias. Referências relacionadas: PMID:23880187
• CD14 está predominantemente localizado na membrana celular, enriquecido em jangadas de membrana, e também é detectado no Golgi; uma forma solúvel é secretada.
• É fortemente expresso em monócitos e macrófagos teciduais e fracamente em granulócitos, atuando como um marcador de superfície essencial para a identificação de monócitos/macrófagos.
• A proteína contém ligações dissulfeto intr cadeia e é modificada pós-traducionalmente por N-glicosilação, contribuindo para sua estabilidade estrutural e para as interações com ligantes.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para citometria de fluxo, faça uma titulação do anticorpo para determinar a concentração ideal para o seu tipo específico de célula e condições de coloração.
• Inclua controles de isotipo apropriados e, se possível, controles de fluorescência menos um (FMO) para avaliar a coloração de fundo.
• Este anticorpo detecta CD14 em células mononucleares do sangue periférico humano e de macaco-cinomolgo; confirme a reatividade na sua amostra-alvo.
• O imunógeno (aa 20-352) abrange o domínio extracelular do CD14, sugerindo o possível reconhecimento tanto das formas ancoradas por GPI na membrana quanto das formas solúveis.
• Certifique-se de que os protocolos de fixação/permeabilização sejam compatíveis com o fluoróforo caso seja necessária a coloração intracelular.

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