Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD20 Humano/ Macaco para CF - P11836

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD20

• O CD20 (antígeno CD20 dos linfócitos B) é uma proteína transmembrana específica das células B pertencente à subfamília A dos domínios 4 transmembrana (MS4A), codificada pelo gene MS4A1. O splicing alternativo pode gerar múltiplas isoformas.
• Funciona como componente de um canal de cálcio operado por armazenamento (SOC), regulando o influxo de cálcio após a ativação do receptor de células B (BCR), o que é essencial para o desenvolvimento, a diferenciação e a ativação das células B.
  Referências relacionadas:
  PMID:12920111
  PMID:3925015
  PMID:7684739
  PMID:18474602
• O CD20 está localizado na membrana celular e é expresso especificamente nos linfócitos B, mas não nas células B precursoras ou nas células plasmáticas, sendo um marcador essencial para a identificação das células B.
• As modificações pós-traducionais incluem palmitoilação e fosforilação, que podem regular sua associação à membrana e sua atividade. Também contém ligações dissulfeto e é uma lipoproteína.
• O CD20 é um alvo farmacêutico bem estabelecido; os anticorpos monoclonais contra o CD20 (por exemplo, rituximabe) são utilizados no tratamento de neoplasias malignas das células B e de doenças autoimunes, destacando sua relevância clínica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético dos aminoácidos 100-200 do CD20 humano, que provavelmente abrange o grande loop extracelular entre os domínios transmembrana 3 e 4. Isso sugere que o anticorpo pode reconhecer um epítopo extracelular, tornando-o adequado para citometria de fluxo em células vivas não fixadas.
• Para citometria de fluxo, use o anticorpo em uma diluição ideal determinada por titulação em células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) humanas ou de macaco-cinomolgo, ou em linhagens de células B que expressem CD20. Garanta o bloqueio adequado dos receptores Fc e inclua controles de isotipo apropriados.
• Se o anticorpo for fornecido em formato conjugado (por exemplo, com o corante ), ele poderá ser utilizado diretamente para marcação em uma única etapa. Se não for conjugado, será necessário um anticorpo secundário anti-coelho marcado com fluoróforo para detecção.
• Considere a realização de multiplexação com outros marcadores de células B (por exemplo, CD19, CD21) para caracterizar subpopulações de células B em painéis de imunofenotipagem.

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