Anticorpo Monoclonal de Coelho anti-CD4 Humano/ de Macaco para FC - P01730

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD4

• O CD4 é uma glicoproteína transmembrana do tipo I de 51 kDa pertencente à superfamília das imunoglobulinas, também conhecida como T4 ou Leu-3.
• Atua como correceptor das moléculas do MHC de classe II, ligando-se simultaneamente ao receptor das células T (TCR) e ao MHC de classe II nas células apresentadoras de antígenos, levando ao recrutamento de LCK e à sinalização a jusante.
• O CD4 é essencial para o desenvolvimento das células T auxiliares no timo e promove a diferenciação de monócitos em macrófagos de maneira independente de TCR/LCK.
• Altamente expresso nas células T auxiliares, o CD4 também está presente em macrófagos, células dendríticas e células NK, mediando a adesão e a migração.
• O CD4 é o principal receptor do HIV-1, facilitando a entrada viral nas células hospedeiras (PubMed:12089508, PubMed:16331979, PubMed:2214026). Referências relacionadas: PMID:12089508, PMID:16331979, PMID:2214026
• A proteína Vpu do HIV-1 reduz a expressão de CD4 para evadir as respostas imunes (PubMed:17346169). Referências relacionadas: PMID:17346169
• O CD4 também atua como receptor do Herpesvírus Humano 7 (HHV-7) (PubMed:7909607). Referências relacionadas: PMID:7909607
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada a N, formação de pontes dissulfeto, palmitoilação e fosforilação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo tem como alvo o domínio extracelular do CD4, sendo adequado para citometria de fluxo em células vivas sem permeabilização.
• O fluoróforo é excitado pelo laser de 488 nm e emite no canal verde (normalmente com o conjunto de filtros FITC/GFP); verifique a compatibilidade com a configuração do seu citômetro.
• Para obter uma coloração ideal, titule o anticorpo a fim de determinar a concentração apropriada para o seu tipo específico de célula e condições experimentais.
• Utilize controles de isotipo apropriados e controles de fluorescência menos um (FMO) para estabelecer as estratégias de gating e avaliar a coloração de fundo.
• A expressão de CD4 varia entre os subconjuntos de células T e os estados de ativação; valide o anticorpo no seu sistema utilizando populações celulares positivas e negativas bem caracterizadas.
• Como o CD4 é o receptor do HIV, evite utilizar linhagens celulares ou células primárias que contenham HIV, pois isso pode interferir na ligação do anticorpo ou reduzir a expressão de CD4.
• Se for necessária a coloração intracelular, teste o desempenho do anticorpo após a fixação e a permeabilização, pois essas etapas podem afetar o reconhecimento do epítopo.
• Foi relatado que o anticorpo apresenta reatividade cruzada com o CD4 de macaco cynomolgus; para outras espécies, realize um experimento de validação.

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