Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano/Macaco CD45 para Citometria de Fluxo - P08575

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD45

• A tirosina-proteína fosfatase tipo receptor C (CD45), codificada pelo gene PTPRC, também é conhecida como antígeno comum de leucócitos (L-CA) e T200. Existem múltiplas isoformas devido ao splicing alternativo.
• Essencial para a ativação de células T pelo receptor de antígeno; o primeiro domínio PTPase tem atividade enzimática, enquanto o segundo modula a especificidade pelo substrato. Após a ativação de células T, o CD45 recruta e desfosforila SKAP1 e FYN, além de modular a atividade de LYN. Referências relacionadas: PMID:35767951
• Atua como receptor para a proteína UL11 do citomegalovírus humano, medindo a ligação viral às células T e prejudicando a proliferação e a sinalização celular.
• Localiza-se na membrana celular, nas microdomínios de membrana e na sinapse imunológica, posicionando-se nos locais de reconhecimento de antígeno e transdução de sinal.
• As isoformas 1–3, 5 e 7 são detectadas em timócitos, enquanto as isoformas 4, 6 e 8 não são, indicando padrões de expressão específicos de tecido.
• É modificado pós-tradução por glicosilação e fosforilação; classificado nas palavras-chave hidrolase, fosfatase de proteínas, glicoproteína e interação hospedeiro-vírus.
• Pertence à família das proteína-tirosina fosfatases, subfamília receptor classe 1/6, atuando como um centro de sinalização chave nas células imunológicas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende os aminoácidos 26–577 do CD45 humano, englobando a região extracelular; portanto, espera-se que o anticorpo reconheça epítopos extracelulares nativos.
• Para citometria de fluxo, titule o anticorpo para determinar a concentração ideal para o seu tipo de célula e configurações do instrumento específicos; use um controle de isotipo adequado.
• Valide a coloração em células conhecidas por serem positivas para CD45 (ex.: PBMC humanas, Jurkat) e células negativas (ex.: eritrócitos).
• Como o CD45 é altamente expresso em leucócitos, considere o bloqueio do receptor Fc para minimizar a ligação não específica.
• O conjugado é compatível com filtros de emissão comuns (ex.: 614/20 nm); garanta a compensação adequada em painéis multicoloridos.
• A fixação e permeabilização podem alterar o reconhecimento do epítopo do CD45; teste se a coloração de superfície é suficiente para o seu protocolo.
• Armazene o anticorpo não diluído a 2–8°C, protegido da luz, e evite ciclos repetidos de congelamento-descongelamento para manter a integridade do conjugado.

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