mAb Coelho contra HLA-DR Humano/Macaco para FC - P01903

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HLA-DRA

• O gene HLA-DRA codifica a cadeia alfa da molécula MHC de classe II HLA-DR, que se emparelha com a cadeia beta (HLA-DRB) para apresentar antígenos às células T CD4+, desencadeando respostas imunes adaptativas, incluindo a produção de anticorpos e a ativação de macrófagos.
  Referências relacionadas:
  PMID:15265931 PMID:15322540 PMID:17334368
• Ele apresenta antígenos peptídicos extracelulares de 10 a 30 aminoácidos gerados pela proteólise lisosomal de antígenos endocitados; um grande reseto de âncora hidrofóbico na posição 1 do peptídeo é fundamental para a ligação estável ao MHCII.
  Referências relacionadas:
  PMID:8145819
• Em tumores, o HLA-DR apresenta peptídeos antigênicos derivados de células tumorais apoptosas fagocitadas ou da macropinocitose de proteínas tumorais secretadas, moldando a imunidade antitumoral.
  Referências relacionadas:
  PMID:31495665
• A macroautofagia captura proteínas intracelulares em autofagolisossomos; seus peptídeos são então apresentados pelo HLA-DR, um processo importante para a seleção de células T tímicas e a tolerância central.
  Referências relacionadas:
  PMID:17182262 PMID:23783831
• Dois modos de seleção de epítopos operam: "ligar primeiro, cortar/aparar depois" para antígenos derivados de patógenos e "cortar primeiro, ligar depois" para autopepídeos, influenciando a immunodominância.
  Referências relacionadas:
  PMID:25413013
• A localização subcelular abrange a membrana celular, retículo endoplasmático, endossomos precoces e tardios, lisossomos e autofagolisossomos, refletindo seu tráfego dinâmico durante o processamento de antígenos.
• A expressão tissular é restrita a células profissionais apresentadoras de antígeno (macrófagos, células dendríticas, células B) e células epiteliais tímicas.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação N-ligada, pontes dissulfeto, ligações isopeptídicas e conjugação semelhante à ubiquitina, que modulam a estabilidade do MHCII e o carregamento de peptídeos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O é um fluoróforo brilhante e fotoestável conjugado diretamente ao anticorpo; não é necessário reagente de detecção secundário, minimizando o fundo inespecífico na citometria de fluxo.
• Este anticorpo monoclonal de coelho tem como alvo a cadeia HLA-DRA quase invariante, tornando-o um marcador pan-HLA-DR para células imunes humanas e de macaco cynomolgo.
• Para uma coloração ideal, titule o anticorpo no tipo de célula relevante para determinar a concentração que proporciona a separação máxima entre as populações positivas e negativas. Inclua controles de isotipo adequados e bloqueio de Fc, se necessário.
• Valide o painel de coloração com controles de cor única e controles de menos um fluoróforo (FMO) para garantir compensação e gating precisos, especialmente em experimentos multicoloridos.
• Considere fixar as células após a coloração com um fixativo compatível para preservar a fluorescência e a estabilidade da amostra para análise posterior.

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