Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano/Macaco Ki67 para Citometria de Fluxo - P46013

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Ki67

• Ki67 é uma proteína nuclear amplamente utilizada como marcador de proliferação, com duas isoformas de aproximadamente 319 kDa e 359 kDa devido ao splicing alternativo.
• Durante a mitose inicial, o Ki67 se transloca dos nucléolos para a superfície dos cromossomos, formando uma estrutura semelhante a uma escova que impede a agregação cromossômica por repulsão estérica e eletrostática, garantindo a motilidade independente dos cromossomos. Referências relacionadas: PMID:27362226
• Na anáfase, a desfosforilação desencadeia uma mudança funcional: o Ki67 colapsa em uma fase condensada que atrai os cromossomos, facilitando a reforma do envelope nuclear e a exclusão de partículas citoplasmáticas. Referências relacionadas: PMID:32879492 PMID:39153474
• O Ki67 se liga a RNAs ribossomais precoces durante a anáfase, promovendo a separação de fases líquido-líquido na superfície dos cromossomos, que é crítica para a aglutinação cromossômica. Referências relacionadas: PMID:28935370 PMID:39153474
• A proteína também se liga ao DNA com preferência por sequências superenroladas e ricas em AT, embora seu papel direto na organização da cromatina ainda não esteja claro. Referências relacionadas: PMID:10878551
• Localização subcelular: o Ki67 é encontrado predominantemente no nucléolo durante a interfase, se associa aos cromossomos em condensação na mitose e reveste toda a superfície cromossômica.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação, acetilação e ubiquitinação, que regulam suas funções mitóticas e sua estabilidade.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 2271-2370 do Ki67 humano, localizado na região C-terminal. Certifique-se de que o epitopo alvo esteja acessível nas condições de fixação e permeabilização planejadas.
• Para citometria de fluxo intracelular (FC intra), use buffers de permeabilização compatíveis com antígenos nucleares. Inclua controles de isótipo adequados e valide a coloração em uma linha celular proliferante conhecida (ex.: HeLa, Jurkat) em comparação com um controle não proliferante.
• A reatividade cruzada com macaco cynomolgo está documentada; verifique em seu sistema experimental específico se for trabalhar com outras espécies.
• O fluoróforo conjugado é um substituto do Pacific Blue/eFluor 450; certifique-se da compatibilidade com o seu equipamento e evite a exposição prolongada à luz.

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