Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Mouse CD117/c-Kit para Citometria de Fluxo - P05532

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD117/c-Kit

• CD117/c-Kit é um receptor de tirosina quinase para o fator de célula-tronco (SCF/KITLG), codificado pelo gene Kit. Múltiplas isoformas exibem distribuições teciduais distintas.
• Após a ligação ao SCF, o KIT ativa cascatas de sinalização downstream que incluem as vias PI3K/AKT, RAS/MAPK e JAK/STAT, que regulam a sobrevivência celular, a proliferação, a hematopoiese e a gametogênese.
• A estrutura do receptor inclui cinco domínios extracelulares do tipo imunoglobulina, uma única hélice transmembrana e um domínio intracelular de tirosina quinase.
• O KIT é principalmente um receptor de membrana celular; ele sofre internalização após a ativação e pode se localizar transitoriamente no citoplasma.
• A autofosforilação em resíduos de tirosina desencadeia a sinalização downstream, enquanto a ubiquitinação regula a degradação do receptor e a atenuação do sinal.
• As isoformas 1 e 2 são expressas na medula óssea, espermatogônias e espermatócitos; a isoforma 3 é detectada em células germinativas de estágio mais tardio. A isoforma 1 é amplamente expressa em tecidos hematopoiéticos.
• Como proto-oncogene, o KIT está associado a processos oncogênicos quando desregulado; suas mutações ou superexpressão estão ligadas a diversas malignidades.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este conjugado é validado para citometria de fluxo direta em amostras de camundongo. Para outras aplicações (ex.: IHC, WB), recomenda-se a otimização e validação independente.
• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aa 25–523), tornando o anticorpo adequado para coloração de superfície de células vivas sem permeabilização.
• Excitação e detecção: o pode ser excitado por laser vermelho (633–640 nm) e detectado no canal APC. Garanta a compensação correta em painéis multicoloridos.
• Para melhorar a discriminação entre células vivas e mortas, considere a co-coloração com um corante de viabilidade, pois o CD117 pode ser eliminado ou internalizado em células apoptóticas.
• Para citometria de fluxo quantitativa, inclua um controle de isotipo adequado e realize a titulação do anticorpo para determinar as concentrações de coloração ideais.

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