mAb Coelho anti-Mouse CD126/IL-6Rα cadeia - P22272

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da IL-6Rα

• IL-6Rα (subunidade alfa do receptor da interleucina-6) é uma glicoproteína transmembrana do tipo I pertencente à família dos receptores de citocinas do tipo I, caracterizada por uma região extracelular com domínios semelhantes a imunoglobulinas e um motivo conservado WSXWS.
• Ela atua como a subunidade de ligação de baixa afinidade para IL-6 e não pode sinalizar independentemente; a formação do complexo de alta afinidade com IL6ST/gp130 é necessária para ativar as vias JAK/STAT e MAPK a jusante.
• A sinalização clássica de IL-6, mediada pela IL-6Rα ligada à membrana, é predominantemente regenerativa e anti-inflamatória, e sua expressão é amplamente restrita a hepatócitos e certos subconjuntos de células imunes.
• A IL-6Rα solúvel (sIL6R), produzida por clivagem proteolítica ou splicing alternativo, forma um complexo com IL-6 para permitir a trans-sinalização via gp130 em células que não expressam IL-6Rα endógena. Esse modo pró-inflamatório é central para condições inflamatórias crônicas (PubMed:11113088; Por similaridade). Referências relacionadas: PMID:11113088
• Por meio da sinalização por agrupamento, os complexos membranares de IL-6/IL-6Rα em células dendríticas direcionam a polarização de células T CD4+ virgens para o fenótipo Th17, conectando a imunidade inata e adaptativa (PubMed:27893700). Referências relacionadas: PMID:27893700
• sIL6R é necessária para hepatoproteção e regeneração hepática após lesão (PubMed:11113088), e a trans-sinalização no sistema nervoso central é crítica para a regulação da homeostase energética e da glicose (PubMed:28402851). Referências relacionadas: PMID:11113088 PMID:28402851
• A proteína é modificada por glicosilação N-ligada e contém ligações dissulfeto conservadas, que são essenciais para o enovelamento correto, estabilidade e interação com o ligante.
• IL-6Rα é expressa em células dendríticas nos tecidos linfoides e é encontrada na forma solúvel no líquido cefalorraquidiano, refletindo seus papéis duplos na vigilância imun e na comunicação entre o sistema imune e nervoso.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende toda a região extracelular (aa 20‑357), portanto o anticorpo provavelmente detecta um epítopo dentro do domínio de ligação ao ligante e pode reconhecer tanto as formas ligada à membrana quanto solúvel de IL‑6Rα.
• Para citometria de fluxo, titule o anticorpo para determinar a concentração ótima de coloração; use controles de isotipo e bloqueio do receptor Fc para minimizar o fundo.
• Certifique-se de que seu citômetro de fluxo esteja equipado com um laser apropriado (ex.: 633‑647 nm) e filtro (ex.: 660/20) para o fluoróforo .
• Valide o anticorpo em populações de células de camundongo relevantes, como esplenócitos ou células dendríticas derivadas de medula óssea, que são conhecidas por expressar IL‑6Rα.
• Considere que o anticorpo pode neutralizar ou bloquear a ligação de IL-6 se seu epítopo se sobrepor ao sítio de ligação à citocina; a pré-incubação com IL-6 recombinante pode ajudar a determinar se a coloração é afetada.

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