Anticorpo monoclonal de coelho anti-CD126/cadeia IL-6Rα de camundongo para citometria de fluxo - P22272

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da subunidade alfa do receptor da interleucina-6

• A subunidade alfa do receptor da interleucina-6 (IL-6Rα), também conhecida como IL-6R1 ou CD126, é uma proteína de membrana do tipo I de passagem única, pertencente à família de receptores de citocinas do tipo I. Ela contém um domínio semelhante à imunoglobulina e requer associação com gp130 (IL6ST) para a transdução de sinais.
• A forma ligada à membrana do IL-6Rα liga-se à interleucina-6 (IL-6) com baixa afinidade, desencadeando a sinalização clássica após o recrutamento de gp130, o que regula as respostas imunes, as reações de fase aguda e a hematopoiese. Esse modo é restrito a tecidos como o fígado e determinadas células imunes.
• Uma forma solúvel (sIL6R) é gerada por clivagem ou splicing alternativo. O complexo IL-6:sIL6R (hiper-IL-6) ativa a gp130 em células que não expressam IL-6R de membrana, um processo denominado trans-sinalização, que promove respostas pró-inflamatórias e inflamação crônica (Por similaridade). Ele também é necessário para a produção de VEGF (Por similaridade) e desempenha um papel protetor na regeneração após lesão hepática (PubMed:11113088).
  Referências relacionadas: PMID:11113088
• Na sinalização em agrupamentos, os complexos IL-6:IL-6R ligados à membrana em células dendríticas interagem com a gp130 em células T vizinhas, conduzindo as células T CD4+ naïve para a linhagem Th17 (PubMed:27893700).
  Referências relacionadas: PMID:27893700
• A trans-sinalização da IL-6 no sistema nervoso central regula a homeostase energética e da glicose (PubMed:28402851).
  Referências relacionadas: PMID:28402851
• Localização subcelular: o IL-6Rα está presente na membrana celular e também é secretado como um receptor solúvel. A especificidade tecidual inclui a expressão por células dendríticas e a detecção no líquido cefalorraquidiano.
• As principais modificações pós-traducionais incluem a glicosilação e a formação de pontes dissulfeto, importantes para sua estrutura e função.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aminoácidos 20–357), tornando este anticorpo adequado para detectar o IL-6Rα de camundongo ligado à membrana e solúvel por citometria de fluxo.
• Para citometria de fluxo, titule o anticorpo em linhagens celulares relevantes ou células murinas primárias (por exemplo, esplenócitos e células dendríticas) para determinar a concentração ideal de marcação. Inclua controles positivos apropriados, como linfócitos estimulados com IL-6 ou células derivadas do fígado.
• Considere que a expressão de IL-6R é restrita a determinados tipos celulares; realize uma triagem preliminar de expressão no seu sistema de amostras para confirmar a sensibilidade.
• Ao analisar a dinâmica do receptor solúvel, observe que o anticorpo também pode detectar IL-6Rα ligado à gp130 em células adjacentes nos complexos de trans-sinalização. Valide a especificidade da marcação com controles de bloqueio apropriados.

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