Anticorpo monoclonal de coelho anti-CD140b/PDGFR beta de camundongo para citometria de fluxo - P05622

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do receptor beta do fator de crescimento derivado de plaquetas

• O receptor beta do fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGFR beta, PDGFR-1, CD140b), codificado pelo gene Pdgfrb em camundongos, é membro da família de receptores tirosina-quinase do tipo III, caracterizada por domínios extracelulares semelhantes a imunoglobulinas e um domínio quinase intracelular dividido.
• Ele funciona como receptor de superfície celular para os homodímeros PDGFB e PDGFD, bem como para heterodímeros formados por PDGFA e PDGFB, desempenhando um papel essencial no desenvolvimento embrionário, na proliferação celular, sobrevivência, diferenciação, quimiotaxia e migração.
• O PDGFR beta é fundamental para a maturação dos vasos sanguíneos, promovendo a proliferação, migração e recrutamento de pericitos e células musculares lisas vasculares para as células endoteliais, sendo necessário para o desenvolvimento normal do sistema cardiovascular.
• No rim, é necessário para o recrutamento de células mesangiais para o glomérulo e para a formação de uma rede capilar ramificada; sua expressão é aumentada na fibrose renal.
• A ligação do ligante ativa várias cascatas de sinalização a jusante, incluindo a mobilização de cálcio e a ativação de PKC mediadas por PLCG1, as vias PI3K–AKT e Ras–MAPK, levando ao rearranjo do citoesqueleto e à formação de ondulações na membrana.
• O receptor está localizado principalmente na membrana celular, mas pode ser internalizado em vesículas citoplasmáticas e degradado no lúmen lisossomal após a ativação.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada a N, fosforilação em resíduos de tirosina e serina/treonina, formação de pontes dissulfeto e ubiquitinação; o splicing alternativo produz múltiplas isoformas.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O anticorpo está diretamente conjugado ao , não sendo necessário um reagente de detecção secundário para citometria de fluxo.
• Para uma coloração ideal, faça a titulação do anticorpo (por exemplo, 0,25–2,0 µg por milhão de células) no tipo celular relevante para determinar a melhor relação sinal-ruído.
• Utilize um bloqueio apropriado dos receptores Fc e inclua corantes de viabilidade para excluir células mortas e reduzir a ligação inespecífica.
• O imunógeno compreende o domínio extracelular N-terminal (aa 32–530), sugerindo reatividade com o ectodomínio; a fixação com paraformaldeído pode ser compatível, mas deve ser validada.
• Valide a expressão de PDGFR beta na população-alvo incluindo controles positivos conhecidos (por exemplo, fibroblastos NIH/3T3 e células musculares lisas vasculares) e controles negativos.

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