Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Camundongo CD22 para IF-P e FC - P35329

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD22

• O CD22 (Siglec-2, BL-CAM) é a lectina semelhante à imunoglobulina ligante de ácido siálico (siglec) mais expressa em células B e é crítica para a diferenciação de células B, apresentação de antígenos e homing para a medula óssea. Referências relacionadas: PMID:7533044 PMID:9016707
• Ele funciona como um co-receptor inibitório que atenua a sinalização do receptor de células B (BCR) recrutando a tirosina fosfatase PTPN6/SHP-1 após a fosforilação de seus motivos ITIM pela LYN, levando à redução da mobilização de cálcio e ativação celular. Referências relacionadas: PMID:9016707
• O CD22 se liga a resíduos de ácido siálico ligados α2,6 em si mesmo e em outras moléculas de superfície, como CD45 e IgM, em cis, e também atua como uma molécula de adesão celular através de interações trans com ligantes em outras células.
• A proteína é uma glicoproteína transmembrana tipo I pertencente à família siglec de lectinas semelhantes à imunoglobulina, caracterizada por um domínio Ig do conjunto V N-terminal e múltiplas repetições de Ig do conjunto C2.
• Múltiplos isoformas são produzidos por splicing alternativo, com pesos moleculares observados em torno de 89, 93 e 97 kDa, consistentes com a forma de comprimento total relatada de 97 kDa e possíveis variantes de splicing.
• O CD22 é expresso especificamente em linfócitos B e está localizado na membrana celular, onde faz o vaivém entre a superfície celular e compartimentos intracelulares.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada a N, fosforilação em resíduos de tirosina dentro de motivos ITIM e semelhantes a ITIM, e formação de pontes dissulfeto.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio é derivado da região extracelular (aa 22-151) do CD22 de camundongo, tornando este anticorpo adequado para detectar CD22 exposto na superfície em células não permeabilizadas.
• Para citometria de fluxo (FC), considere titular o anticorpo em linhagens de células B de camundongo relevantes ou esplenócitos primários para determinar a concentração ideal de coloração e minimizar o fundo.
• Na imunofluorescência em tecidos embebidos em parafina (IF-P), otimize as condições de recuperação antigênica, pois o epítopo pode estar parcialmente mascarado pela fixação em formalina, e inclua controles apropriados (por exemplo, células negativas para CD22).
• O corante conjugado é compatível com canais de detecção vermelho/laranja padrão; garanta separação espectral se multiplexar com outros fluoróforos.
• O CD22 é um marcador de células B bem validado; este anticorpo pode ser usado para identificar populações de linfócitos B em tecidos de camundongo, mas a reatividade cruzada com outras espécies não foi testada além do camundongo.

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