Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD23 de Camundongo Conjugado a para Citometria de Fluxo - P20693

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD23

• O CD23, também conhecido como Fc-épsilon-RII ou receptor de Fc de imunoglobulina épsilon de baixa afinidade, é uma proteína transmembrana do tipo II que atua como receptor para IgE e CR2/CD21. Existe em duas isoformas (CD23a e CD23b) geradas por splicing alternativo, diferindo em seus domínios citoplasmáticos.
• Em células B, o CD23 é um regulador chave da síntese de IgE e da diferenciação de células B. Ele media a captura de antígeno dependente de IgE e a subsequente apresentação às células T, influenciando assim a imunidade humoral.
• Em macrófagos, a ligação da IgE e o reticulação do antígeno via CD23 desencadeiam a eliminação intracelular de parasitas através da ativação da via L-arginina-óxido nítrico.
• O CD23 localiza-se principalmente na membrana celular, mas também pode ser liberado como um receptor solúvel por clivagem proteolítica, atuando como uma molécula secretada que modula ainda mais as respostas imunes.
• A proteína sofre modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação ligada a N, palmitoilação e formação de ligações dissulfeto. Ela também contém um domínio lectina do tipo C e um sítio de ligação de cálcio.
• Conforme indicado pelas palavras-chave do UniProt, o CD23 é uma lipoproteína, proteoglicano e proteína de ligação à IgE, destacando seus diversos papéis bioquímicos e associação com a membrana.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno usado para este anticorpo foi uma proteína de fusão recombinante abrangendo os aminoácidos 50-331 do CD23 de camundongo. Esta região engloba o domínio lectina extracelular, garantindo o reconhecimento específico da proteína nativa.
• O anticorpo está diretamente conjugado ao , um fluoróforo do vermelho distante compatível com instrumentos comuns de citometria de fluxo. Seu perfil de excitação/emissão (∼686/713 nm) permite uma boa separação de outros corantes comuns, como FITC, PE ou APC.
• Para citometria de fluxo, considere testar o anticorpo em uma faixa de diluições (por exemplo, 0,5–5 µg/mL) em esplenócitos de camundongo ou leucócitos do sangue periférico, onde o CD23 é expresso em células B e algumas células mieloides.
• Inclua controles de isotipo apropriados e etapas de bloqueio do receptor Fc para minimizar a ligação inespecífica, especialmente em amostras com alta expressão de FcγR.
• Como o peso molecular previsto é de ~37 kDa (não glicosilado), mas a glicoproteína madura migra a ~45–50 kDa em SDS-PAGE, este anticorpo pode não ser adequado para western blotting, a menos que condições de redução/desnaturação sejam cuidadosamente otimizadas. Sua aplicação relatada é especificamente citometria de fluxo.
• Valide a marcação em sua linhagem específica de camundongo e subconjunto celular de interesse, pois os níveis de expressão de CD23 podem variar com o estado de ativação e o microambiente.

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