Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD28 de Camundongo para Citometria de Fluxo - P31041

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD28

• O CD28 é uma glicoproteína de superfície específica de células T que funciona como um receptor coestimulador essencial para a ativação, proliferação, sobrevivência e manutenção da homeostase imunológica das células T (PubMed:7688139). Referências relacionadas: PMID:7688139
• Atua como um amplificador dos sinais do receptor de células T (TCR) e fornece sinais intracelulares únicos que alteram o programa de expressão gênica das células T.
• Após a ligação aos seus ligantes CD80 (B7-1) ou CD86 (B7-2), o CD28 aumenta a produção de múltiplas citocinas, mais proeminentemente a IL-2, tanto em subconjuntos de células T CD4+ quanto CD8+.
• A sinalização envolve o recrutamento da proteína quinase C-theta (PRKCQ) e GRB2, levando à ativação do NF-kappa-B por meio de vias dependentes e independentes de PI3K/Akt.
• Em conjunto com a ligação TCR/CD3 e a coestimulação por CD40L, o CD28 promove a produção de IL-4 e IL-10 nas células T.
• O CD28 está localizado na membrana celular e é uma proteína transmembrana tipo I de passagem única contendo um domínio extracelular semelhante à imunoglobulina do tipo V.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada a N, formação de ligações dissulfeto e fosforilação, que regulam sua expressão na superfície e funções de sinalização.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 20–149) cobre o domínio extracelular, tornando este anticorpo monoclonal adequado para detectar o CD28 nativo na superfície celular por citometria de fluxo.
• Para CF, faça titulação do anticorpo conjugado com para determinar a concentração ideal de coloração e inclua um controle de isotipo para avaliar a ligação inespecífica.
• O tem máximos de excitação/emissão ~650/665 nm; garanta a compensação adequada ao combiná-lo com outros fluoróforos (ex.: PE, FITC) em painéis multicolor.
• Valide a coloração em linhagens de células T de camundongo positivas para CD28 conhecidas ou esplenócitos primários ativados, e considere fixação/permeabilização se alvos intracelulares também forem analisados.

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