Anticorpo monoclonal de coelho anti-CD366 (TIM-3) de rato para Citometria de Fluxo - Q8VIM0

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD366 (TIM-3)

• O CD366 (TIM-3), também conhecido como TIMD-3 ou homólogo 2 do receptor celular do vírus da hepatite A, é uma glicoproteína transmembranar tipo I da superfamília das imunoglobulinas com um domínio de mucina, codificada pelo gene Havcr2 em camundongos. Serve como um receptor de ponto de verificação imunológica com funções duais inibitórias e estimulatórias, dependendo do contexto celular.
• O TIM-3 regula negativamente as respostas autoimunes e aloimunes mediadas por Th1, promovendo tolerância imunológica. Referências relacionadas: PMID:14556006 PMID:18006747
• A ligação ao seu ligante galectina-9 (LGALS9) desencadeia apoptose e supressão de células T, mediadas pela fosforilação de HAVCR2 e dissociação de BAG6, modulando assim a imunidade antiviral e antitumoral. Referências relacionadas: PMID:22863785
• O TIM-3 atua como um receptor para fosfatidilserina (PtSer) de maneira dependente de cálcio, facilitando a fagocitose de células apoptóticas por células dendríticas e promovendo tolerância imunológica. Referências relacionadas: PMID:19224762 PMID:20083673
• Na imunidade inata, o TIM-3 em macrófagos regula a ativação e, em células dendríticas, sinergiza com receptores do tipo Toll para aumentar a secreção de TNF. Em DCs infiltrantes de tumores, ele suprime respostas inatas mediadas por ácidos nucleicos, interferindo com a HMGB1. Referências relacionadas: PMID:11823861 PMID:18006747 PMID:22842346
• O TIM-3 também é expresso em células natural killer (NK), onde pode co-estimular a produção de IFN-γ em resposta à LGALS9 ou suprimir a citotoxicidade mediada por NK, com seu papel regulatório negativo sendo proeminente no choque endotóxico induzido por LPS. Referências relacionadas: PMID:25337993
• Predominantemente localizado na membrana celular e junções celulares; também existe uma isoforma secretada resultante de splicing alternativo. A proteína sofre glicosilação ligada a N, formação de ligações dissulfeto e fosforilação durante a sinalização.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como o imunógeno cobre o domínio extracelular (aminoácidos 20-191), espera-se que este anticorpo detecte o TIM-3 de superfície em células vivas e não permeabilizadas; verifique em seu sistema de amostra.
• Para citometria de fluxo, otimize a concentração do anticorpo por titulação em controles positivos (por exemplo, células Th1 ativadas) e negativos (células T virgens).
• O é um fluoróforo excitado em vermelho compatível com lasers padrão de 633–647 nm; garanta uma compensação adequada usando controles de cor única em painéis multicolor.
• Considere o uso de reagentes de bloqueio de receptores Fc para reduzir a ligação inespecífica ao trabalhar com células imunes de rato.
• A expressão do TIM-3 é dinâmica; valide a marcação sob condições de estimulação apropriadas (por exemplo, ativação com anti-CD3/CD28) e em sua linhagem de rato de interesse.

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