mAb Coelho anti-Mouse CD45.1 - P06800

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de CD45.1

• CD45 (Proteína fosfatase de tirosina tipo receptor C) é uma fosfatase transmembranar codificada pelo gene Ptprc em camundongos. O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, incluindo CD45.1, que diferem no comprimento do domínio extracelular e na glicosilação.
• CD45 funciona como regulador positivo da ativação de linfócitos T ao desfosforilar resíduos de tirosina reguladores negativos em quinases da família Src (por exemplo, LYN, FYN) e no adaptador SKAP1, facilitando a transdução do sinal do TCR.
• A região intracelular contém dois domínios de fosfatase em tandem; o domínio D1 próximo à membrana fornece atividade catalítica, enquanto o D2 modula a especificidade pelo substrato.
• Além dos componentes do TCR, CD45 interage com DPP4 para potencializar a coestimulação e com CLEC10A em células dendríticas imaturas para limitar a autoreatividade, destacando seu papel na homeostase imunológica.
• Ele está ancorado na membrana plasmática e se particiona em lipid rafts; durante a ativação de linfócitos T, CD45 se redistribui para a sinapse imunológica para formar microaglomerados de sinalização.
• CD45 sofre extensa glicosilação N-ligada e fosforilação de serina/treonina/tirosina, que regulam sua localização, conformação e atividade enzimática.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma sequência extracelular (aa 311–410) de CD45.1 de camundongo, indicando que o anticorpo provavelmente reconhece a forma nativa ligada à membrana, o que o torna muito adequado para coloração de superfície em citometria de fluxo.
• Como o anticorpo já é pré-conjugado com , ele pode ser usado diretamente em painéis multicoloridos sem coloração secundária; recomenda-se o uso de controles de compensação adequados.
• Para obter resultados ideais na citometria de fluxo, recomendamos a titulação do anticorpo na sua população celular específica para determinar a concentração de saturação e minimizar o fundo.
• Como CD45.1 é amplamente expresso em todas as células da linhagem hematopoiética, inclua controles de isótipo adequados e gateamento FSC/SSC para distinguir os subconjuntos de leucócitos.
• Ao colorir tecidos ou células com alta expressão de receptores Fc, é aconselhada a pré-incubação com bloqueio de Fc para reduzir a ligação não específica.

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