Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Rato CD5 para Citometria de Fluxo - P13379

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD5

• CD5 é um receptor linfoide específico expresso em todas as células T e no subconjunto B1a de células B, desempenhando papel na regulação da sinalização de TCR/BCR, seleção de timócitos e tolerância imunológica. Referências relacionadas: PMID:35720357
• Interage com os ligantes de células B CD5L e CD72, mediando ajuda de células T dependente de contato para células B e mantendo a homeostasia regulatória de células T/B. Referências relacionadas: PMID:24950378, PMID:9064341, PMID:9723705
• CD5 funciona como um regulador negativo da sinalização de TCR durante o desenvolvimento de timócitos, recrutando proteínas de sinalização como LCK, CD3ζ, PI3K e CBL. Referências relacionadas: PMID:11157848
• A co-participação de CD5 com CD3 promove a fosforilação de CBL e a degradação de VAV1, atenuando a sinalização a jusante (por similaridade).
• Em células B1a, CD5 modula a ativação de células B por meio do influxo de Ca²⁺ mediado por TRPC1, levando à ativação de ERK1/2 e à produção de IL-10 (por similaridade).
• A proteína se localiza na membrana celular como uma glicoproteína transmembrana de tipo I de passagem única, com repetições extracelulares ricas em cisteína do receptor removedor de resíduos, uma hélice transmembrana e uma cauda citoplasmática contendo sítios de fosforilação.
• CD5 também é conhecido como Ly-1, Ly-A, Ly-12 ou Lyt-1 e funciona como marcador pan-T e marcador de células B1a em camundongos.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende os aminoácidos 25-371 do CD5 de camundongo, correspondente a todo o domínio extracelular, permitindo o reconhecimento do CD5 superficial nativo em células viáveis sem permeabilização.
• Para citometria de fluxo, realize uma série de diluições (por exemplo, 1:25 – 1:200) para determinar a concentração de coloração ideal para a sua amostra de células.
• Use anticorpos de controle de isotipo apropriados e inclua corantes de viabilidade para discriminar células vivas/mortas e minimizar o fundo.
• Proteja o anticorpo da luz durante a coloração e o armazenamento, pois a exposição repetida pode reduzir a fluorescência do .
• Protocolos de coloração padrão recomendam incubar 10⁶ células em 100 µL de tampão de coloração por 20–30 minutos no gelo, no escuro, seguido de lavagem.
• Este anticorpo é específico para o CD5 de camundongo; a reatividade cruzada com outras espécies não foi relatada; é recomendada a validação no seu tecido alvo.

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