mAb coelho anti-CD68 de camundongo para IF/ICC e FC - P31996

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD68

• O CD68, também conhecido como macrosialina, Lamp4, gp110 ou Scard1, é uma proteína transmembrana fortemente glicosilada pertencente à família das glicoproteínas de membrana associadas a lisossomos/endossomos (LAMP).
• Ele é predominantemente expresso em macrófagos teciduais e, em menor proporção, em células dendríticas, servindo como um marcador clássico para esses tipos de células fagocíticas.
• O CD68 desempenha um papel nas atividades fagocíticas, participando do metabolismo lisossomal intracelular e mediando interações extracelulares entre células e entre células e patógenos.
• A proteína se liga a lectinas ou selectinas específicas de tecidos e órgãos, facilitando a migração de subconjuntos de macrófagos para locais específicos no organismo.
• O CD68 recicla rapidamente entre endossomos, lisossomos e a membrana plasmática, um processo que pode permitir que macrófagos rastejem sobre substratos que contêm selectinas ou outras células.
• Subcelularmente, o CD68 se localiza nas membranas dos endossomos, nas membranas dos lisossomos e na membrana celular, o que é consistente com seu tráfego dinâmico e suas funções biológicas.
• A proteína contém um peptídeo sinal, um grande domínio luminal/extracelular com repetições semelhantes a mucinas, uma única hélice transmembrana e uma cauda citoplasmática curta, além de estar sujeito a splicing alternativo e formação de pontes dissulfeto.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para imunofluorescência (IF/ICC), considere incluir uma etapa de permeabilização (por exemplo, com Triton X-100 ou saponina) para detectar pools intracelulares de CD68 em lisossomos/endossomos, já que a proteína reside nesses compartimentos.
• Para citometria de fluxo (FC), teste protocolos de células vivas e células fixadas/permeabilizadas para capturar a expressão de CD68 localizada na superfície e a expressão total. Titule o anticorpo para determinar a concentração de coloração ideal para o seu tipo de célula específico e suas condições experimentais.
• Use controles de isotipo adequados e controles de menos um fluorocromo (FMO) para confirmar a especificidade da coloração, especialmente ao analisar populações de macrófagos e células dendríticas.
• Como o imunógeno abrange os aminoácidos 21–291 do CD68 de camundongo (cobrindo o domínio extracelular/luminal), espera-se que o anticorpo reconheça a proteína nativa sob condições desnaturantes e nativas, mas confirme o desempenho na sua aplicação específica por meio de experimentos piloto.

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