Anticorpo Monoclonal Coelho contra Camundongo CD68 para Citometria de Fluxo Intracelular - P31996

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD68

• CD68 (macrosialina, também conhecida como Lamp4, gp110, Scard1) é uma proteína transmembranar fortemente glicosilada pertencente à família das proteínas de membrana associadas a lisossomos (LAMP).
• É expressa predominantemente em macrófagos teciduais e, em menor proporção, em células dendríticas.
• CD68 desempenha um papel nas atividades fagocíticas de macrófagos, participando tanto do metabolismo lisossomal intracelular quanto das interações extracelulares entre células e entre células e patógenos.
• Ela facilita a migração de macrófagos para locais específicos do tecido ao se ligar a lectinas ou selectinas específicas de tecidos e órgãos.
• A proteína recicla rapidamente entre endossomos, lisossomos e a membrana plasmática, um processo que pode ajudar a locomoção de macrófagos sobre substratos que contêm selectinas.
• No nível subcelular, CD68 se localiza principalmente nas membranas de endossomos e lisossomos, com alguma expressão na membrana plasmática.
• As características estruturais incluem peptídeo sinal, hélice transmembranar, múltiplas pontes dissulfeto e sítios de glicosilação N-ligada, consistentes com seu direcionamento lisossomal e estabilidade.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende o domínio luminal de CD68 (aa 21-291); espera-se que essa região esteja exposta após a permeabilização, tornando o anticorpo adequado para citometria de fluxo intracelular.
• Para FC (intra), otimize as etapas de fixação e permeabilização para o seu tipo específico de macrófago ou célula dendrítica; considere usar um controle de isotipo apropriado para avaliar o ruído de fundo.
• Devido à forte glicosilação de CD68, condições desnaturantes ou certos protocolos de fixação podem alterar o reconhecimento do epítopo; recomenda-se a realização de experimentos preliminares de titulação.
• Apesar de validado para citometria de fluxo, o anticorpo também pode ser compatível com imunohistoquímica ou ELISA se o epítopo permanecer acessível; os usuários interessados devem fazer a validação em seus sistemas de amostra alvo.

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