Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Mouse FcγRI/CD64 para FC - P26151

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do FcγRI/CD64

• Codificado pelo gene Fcgr1 em camundongos, o FcγRI (CD64) é um recetor de alta afinidade para a região Fc da imunoglobulina gama (IgG), desempenhando um papel fundamental nas respostas imunes inatas e adaptativas.
• Como membro da superfamília das imunoglobulinas, contém domínios semelhantes à imunoglobulina, uma única hélice transmembranar e uma cauda citoplasmática, características dos recetores Fc ativadores.
• A proteína é fortemente glicosilada e contém ligações dissulfeto que estabilizam os seus domínios extracelulares de ligação ao ligando.
• É expresso especificamente em macrófagos, onde medeia a fagocitose celular dependente de anticorpos (ADCP) e a libertação de citocinas após a reticulação por alvos opsonizados por IgG.
• Localizado na membrana celular, o FcγRI inicia a sinalização intracelular através de motivos de ativação baseados em tirosina de recetores imunes (ITAMs), frequentemente via a cadeia comum FcRγ.
• As modificações pós-traducionais incluem a fosforilação, que modula a sinalização do recetor e a sua internalização.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio abrange o domínio extracelular (aa 25-297), sugerindo que o anticorpo provavelmente reconhece a conformação nativa do recetor, tornando-o adequado para análise por citometria de fluxo (FC).
• Para citometria de fluxo, considere titular o anticorpo para determinar a concentração ideal para o seu tipo de célula específico, utilizando macrófagos de camundongo (por exemplo, macrófagos peritoneais ou a linha celular RAW 264.7) como controlos positivos.
• O bloqueio prévio com bloqueio de Fc (anti-CD16/CD32) pode ser necessário para reduzir a ligação não específica a outros recetores Fc ao corar células de camundongo.
• Nota de que o marcador fluorescente é sensível à luz; manuseie e armazene o anticorpo protegido da luz e evite ciclos repetidos de congelação-descongelação.
• Valide a especificidade da coloração utilizando um controlo de isotipo ou pré-incubando com anticorpo anti-CD64 não marcado.

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