Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-Rato Flt3/CD135 para FC - Q00342

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Flt3/CD135

• A tirosina-proteína quinase do tipo receptor FLT3 (também conhecida como CD135, FLK-2, quinase 2 do fígado fetal) atua como um receptor de superfície celular para a citocina FLT3LG, regulando a diferenciação, proliferação e sobrevivência de células progenitoras hematopoiéticas e células dendríticas.
• Após a ligação do ligando, o FLT3 promove a fosforilação de SHC1, AKT1 e a ativação de MTOR, bem como a sinalização dependente de RAS via MAPK1/ERK2 e MAPK3/ERK1. Também medeia a fosforilação de FES, FER, PTPN6/SHP, PTPN11/SHP-2, PLCG1 e STAT5A/STAT5B, embora a ativação de STAT5 pelo FLT3 de tipo selvagem seja marginal.
• Mutações que causam atividade constitutiva da quinase impulsionam a proliferação celular e a resistência à apoptose através de múltiplas vias a jusante, destacando o seu papel proto-oncogénico.
• A expressão tecidual é predominantemente em populações enriquecidas de células estaminais e progenitoras hematopoiéticas, com deteção adicional no cérebro, placenta e testículo.
• Subcellularmente, o FLT3 localiza-se na membrana plasmática e no lúmen do retículo endoplasmático.
• A proteína apresenta domínios de imunoglobulina extracelulares, uma única hélice transmembranar e um domínio de tirosina quinase intracelular. Modificações pós-traducionais-chave incluem glicosilação, formação de ligações dissulfureto e autofosforilação induzida por ligando.
• Palavras-chave associadas ao FLT3: Ligação a ATP, Ligação dissulfureto, Glicoproteína, Domínio de imunoglobulina, Quinase, Membrana, Ligação a nucleótidos, Fosfoproteína, Proto-oncogene, Recetor, Transferase, Hélice transmembranar, Tirosina-proteína quinase, Conjugação Ubl.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio compreende uma proteína de fusão recombinante que abrange os aminoácidos 28–544 do CD135 de rato (NP_034359.2). Considere verificar a reatividade com a proteína nativa em células hematopoiéticas primárias de rato.
• Para citometria de fluxo, faça uma titulação do anticorpo em células do baço ou medula óssea de rato para determinar a concentração ótima de coloração. Utilize bloqueio do recetor Fc para minimizar a ligação inespecífica.
• Ao desenhar painéis multicolor, tenha em conta as propriedades espectrais do fluoróforo e realize controlos de compensação apropriados.
• O anticorpo é recomendado para amostras de rato; reatividade cruzada com outras espécies não foi relatada e deve ser testada independentemente, se necessário.
• Valide a especificidade comparando a coloração em modelos de knockout de Flt3 ou com linhas celulares que expressem diferencialmente o CD135.
• Como o FLT3 funciona na manutenção de células estaminais hematopoiéticas e no desenvolvimento de células dendríticas, este reagente pode suportar imunofenotipagem, deteção de células estaminais leucémicas ou investigação da sinalização impulsionada por FLT3-ITD.

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