Anticorpo Monoclonal Coelho anti-IgE de Rato para FC - P06336

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Região Constante da IgE de Rato

• A cadeia epsilon constante pesada da imunoglobulina (IgE) é a região constante da cadeia pesada da imunoglobulina, formando parte do anticorpo IgE. Este isotipo de anticorpo desempenha um papel central nas respostas alérgicas e infecções parasitárias.
• A IgE funciona tanto como receptor ligado à membrana em células B quanto como anticorpo secretado. A IgE ligada à membrana atua como receptor de célula B, desencadeando expansão clonal e diferenciação em células plasmáticas após a ligação ao antígeno. A IgE secretada liga-se aos receptores Fcε de alta afinidade em mastócitos e basófilos, mediatando a degranulação e a inflamação.
• O processamento das cadeias pesadas de imunoglobulina envolve recombinação V(D)J e hipermutação somática, que geram diversidade e permitem a maturação por afinidade do sítio de ligação ao antígeno.
• A IgE é expressa em duas formas: uma forma ligada à membrana na superfície dos linfócitos B e uma forma secretada liberada pelas células plasmáticas. A forma secretada é encontrada nos espaços extracelulares e tecidos mucosos.
• A localização subcelular inclui a membrana celular para a forma ligada à membrana e o espaço extracelular para a forma secretada. A proteína sofre modificações pós-tradução como glicosilação e formação de pontes dissulfeto, essenciais para sua estrutura e função.
• Como membro da superfamília das imunoglobulinas, a região constante contém domínios de imunoglobulina que contribuem para as funções efetoras e interações com receptores.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 83-421 da IgE de rato, cobrindo uma grande parte da região constante. Este design provavelmente garante o reconhecimento da IgE nativa, mas os usuários devem validar a especificidade em sua amostra alvo.
• Para citometria de fluxo intracelular, um protocolo de fixação e permeabilização adequado para proteínas intracelulares deve ser otimizado. Considere testar diferentes tampões de permeabilização e tempos de incubação.
• Como a IgE é expressa em níveis baixos em células B em repouso, mas regulada positivamente após a ativação, a ativação das células B (por exemplo, com IL-4 e anti-CD40) pode melhorar a detecção.
• Use controles de isotipo adequados e compensação ao analisar a fluorescência do . O anticorpo é reativo com a IgE de rato; não é esperada reatividade cruzada com outras espécies com base no imunógeno utilizado.
• Valide o padrão de coloração em linhagens celulares conhecidas por expressar IgE ou em células B primárias de rato.

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