Anticorpo monoclonal de coelho anti-IL1R1/CD121a de camundongo para citometria de fluxo - P13504

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de IL1R1/CD121a

• O receptor tipo 1 da interleucina-1 (IL1R1), também conhecido como CD121a, IL-1R alfa e p80, é codificado pelo gene Il1r1 em camundongos.
• Funciona como receptor para a interleucina-1 alfa (IL1A), a interleucina-1 beta (IL1B) e o antagonista do receptor de IL-1 (IL1RN), ligando-se a esses ligantes com afinidade comparável.
• Após a ligação ao ligante, o IL1R1 associa-se ao correceptor IL1RAP para formar um complexo de sinalização de alta afinidade, levando à ativação das vias NF-kappa-B e MAPK.
• A sinalização envolve o recrutamento, mediado pelo domínio TIR, de proteínas adaptadoras como TOLLIP, MYD88, IRAK1 ou IRAK2.
• A isoforma 2 é expressa nos tecidos cerebrais e, juntamente com a isoforma 3 de IL1RAP, medeia a atividade neuronal induzida por IL1B, incluindo a potencialização do influxo de cálcio mediado pelo receptor NMDA por meio da ativação da quinase Akt.
• IL1R1 é uma glicoproteína transmembranar com ligações dissulfeto e domínios semelhantes aos das imunoglobulinas, pertencente à família dos receptores de interleucina-1.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação e glicosilação; uma forma secretada também foi identificada.
• Desempenha um papel nas respostas inflamatórias e na coestimulação, pelas células T auxiliares 1 (Th1), da produção de IFNG.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 20–338) abrange o domínio extracelular de IL1R1 de camundongo, tornando-o adequado para detectar a expressão na superfície por citometria de fluxo sem permeabilização.
• O conjugado é excitado pelo laser de 488 nm e emite no canal verde (por exemplo, FITC/GFP); assegure a compensação se for utilizado em painéis multicoloridos.
• Titule o anticorpo para determinar a concentração ideal para seu tipo específico de célula e condições de coloração; as diluições iniciais típicas variam de 1:50 a 1:200.
• Inclua um anticorpo de controle isotípico apropriado conjugado ao mesmo fluoróforo para avaliar a ligação inespecífica.
• Os receptores Fc de camundongo podem ser bloqueados usando anti-CD16/CD32 (Fc Block) para reduzir o fundo, especialmente ao utilizar células com alta expressão de receptores Fc.
• Prepare suspensões de células únicas e use um corante de viabilidade para excluir células mortas, que podem se ligar aos anticorpos de forma inespecífica.
• A fixação com paraformaldeído pode afetar o epítopo; valide as condições de fixação caso seja necessária a fixação após a coloração.

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