Anticorpo monoclonal de coelho anti-Ki67 de camundongo - E9PVX6

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do Ki67

• Codificada pelo gene Mki67 e também conhecida como Ki-67, homóloga do antígeno KI-67 ou proteína marcadora de proliferação Ki-67, essa grande proteína nuclear é expressa em células em ciclo ativo.
• Associa-se à superfície dos cromossomos mitóticos e atua como um repelente cromossômico durante o início da mitose, sendo necessária para manter a dispersão individual dos cromossomos após a ruptura do envelope nuclear (PubMed:27362226). Referências relacionadas: PMID:27362226
• Durante a fase final da mitose, transforma-se em um atrator cromossômico, promovendo o agrupamento dos cromossomos e ajudando a excluir grandes partículas citoplasmáticas do futuro espaço nuclear.
• Forma estruturas estendidas semelhantes a escovas na superfície dos cromossomos, que fornecem uma barreira estérica e eletrostática; sua alta carga líquida atua como um surfactante, impedindo o colapso dos cromossomos em uma única massa (PubMed:27362226). Referências relacionadas: PMID:27362226
• É regulada por fosforilação: a desfosforilação durante a saída da mitose expõe uma região básica conservada, desencadeando a separação de fases líquido-líquido dependente de RNA nas superfícies cromossômicas para promover o agrupamento.
• Liga-se ao DNA com preferência por regiões superenroladas e ricas em AT, além de se ligar a RNAs ribossômicos prematuros durante a anáfase.
• Localiza-se nos nucléolos durante a interfase e se desloca para a superfície dos cromossomos durante a mitose; está presente principalmente em células proliferativas.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação e ubiquitinação, em consonância com a complexa regulação do ciclo celular.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1816–2163 do Ki67 de camundongo, abrangendo uma região C-terminal; pode reconhecer a proteína de comprimento total e possíveis isoformas.
• Para citometria de fluxo intracelular, assegure protocolos adequados de fixação e permeabilização, pois o alvo é nuclear.
• Valide o anticorpo no seu tipo celular e contexto experimental específicos; a expressão de Ki67 varia ao longo do ciclo celular.
• Considere utilizar uma contracoloração nuclear ou uma coloração conjunta com marcadores do ciclo celular para confirmar a localização e a especificidade.

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