Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Mouse Ki67 para Citometria de Fluxo (Intracelular) - E9PVX6

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de Ki67

• A proteína marcadora de proliferação Ki‑67 (homolog do antígeno KI‑67), codificada pelo gene Mki67, associa-se à superfície dos cromossomos mitóticos e desempenha um papel crítico na dispersão e agrupamento dos cromossomos durante a mitose.
• É necessária para manter os cromossomos mitóticos individuais dispersos no citoplasma após a desmontagem do envelope nuclear, agindo como um repelente cromossômico durante a mitose inicial e um atraente cromossômico durante a mitose tardia. Referências relacionadas: PMID:27362226
• Durante a mitose inicial, Ki‑67 forma estruturas estendidas semelhantes a escovas que cobrem grande parte da superfície cromossômica; essa escova cria uma barreira de carga esteira e eletrostática, funcionando como um surfactante para evitar que os cromossomos colapsem em um único massa de cromatina. Referências relacionadas: PMID:27362226
• Na anáfase, a estrutura em escova de Ki‑67 colapsa; a desfosforilação durante a saída da mitose expõe um patch básico conservado que induz a separação de fase líquido-líquido dependente de RNA, mudando Ki‑67 para um atraente cromossômico que promove o agrupamento dos cromossomos.
• Não contribui para a estrutura interna dos cromossomos mitóticos. Referências relacionadas: PMID:26949251
• Subcelularmente, se localiza no cromossomo, núcleo e nucléolo; está presente principalmente em células em proliferação. Contém domínios para ligação ao DNA (preferindo DNA superenrolado e rico em AT) e está sujeito a acetilação, fosforilação e ubiquitinação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a região C-terminal (aa 1816‑2163) que contém os domínios de repetição de Ki67 importantes para a associação com os cromossomos; essa região é relativamente conservada, podendo suportar reatividade cruzada em espécies relacionadas.
• Otimizado para citometria de fluxo intracelular; certifique-se de usar protocolos adequados de fixação e permeabilização para permitir que o anticorpo acesse o Ki67 nuclear. Inclua controles de isotipo apropriados e valide em uma linha celular de camundongo proliferante conhecida.
• O grande tamanho da proteína (351 kDa) pode representar desafios para outras técnicas, como o Western blotting; se explorar outras aplicações, considere tempos estendidos de eletroforese e transferência, e sempre valide o desempenho empiricamente.

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