Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Murino LAMP1/CD107a para IF/ICC, FC - P11438

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de LAMP1/CD107a

• A glicoproteína 1 associada à membrana do lisossomo (LAMP1/CD107a) é uma proteína transmembrana altamente glicosilada, também conhecida como LGP-120, P2B ou CD107a.
• Essencial para a biogênese de lisossomos, regulação do pH, autofagia e homeostase do colesterol, agindo como inibidor direto do canal de prótons TMEM175 para manter o lúmen ácido. Referências relacionadas: PMID:15121881
• Em células assassinas naturais (NK), LAMP1 participa do movimento de grânulos citotóxicos para a superfície celular e do tráfego de perfurina para os grânulos líticos, permitindo a eliminação de células-alvo.
• Protege as células NK de danos associados à degranulação, evitando lesões autoinfligidas pelos próprios conteúdos dos grânulos citotóxicos. Referências relacionadas: PMID:23847195
• Apresenta ligantes de carboidratos a selectinas e está implicado na metástase de células tumorais. Referências relacionadas: PMID:2676155
• Localiza-se principalmente nas membranas de lisossomos e endossomos tardios, mas também trafega para a membrana celular e a membrana de grânulos citolíticos após ativação.
• As modificações pós-traducionais incluem extensa glicosilação N-ligada e formação de pontes dissulfeto, críticas para sua estabilidade estrutural e função no ambiente lisossomal.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para imunofluorescência (IF/ICC), use fixação adequada (ex: 4% PFA) e permeabilização (ex: 0,1% Triton X-100) para permitir o acesso do anticorpo aos compartimentos lisossomais intracelulares. O fluoróforo conjugado elimina a necessidade de anticorpo secundário, simplificando o protocolo.
• Em citometria de fluxo (FC), LAMP1 é predominantemente intracelular em condições de repouso, mas pode ser detectado na superfície celular após ativação celular (ex: degranulação de células NK). Considere incluir uma etapa de ativação celular e usar um corante de viabilidade para excluir células mortas.
• Valide o anticorpo em uma linhagem celular de camundongo ou sistema de células primárias relevante conhecido por expressar LAMP1 (ex: macrófagos RAW 264.7 ou células NK primárias) e inclua controles de isotipo adequados para FC.
• O imunógeno cobre os aminoácidos 208–363 do domínio luminal, que pode ser sensível à desnaturação; evite fixação excessiva que possa mascarar o epitopo.

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