Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Rato S100A9 para Citometria de Fluxo (Intracelular) - P31725

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de S100A9

• S100A9 (também conhecido como calgranulina-B, MRP14, p14) é um membro da família S100 de proteínas ligantes de cálcio, com peso molecular de aproximadamente 13 kDa.
• S100A9 é uma proteína ligante de cálcio e zinco que desempenha papel proeminente na regulação de processos inflamatórios e na resposta imunológica. Referências relacionadas: PMID:15331440 PMID:17767165 PMID:18403730
• Intracelularmente, como parte do complexo calprotectina com S100A8, facilita o tráfego e o metabolismo do ácido araquidônico em leucócitos, modula o citoesqueleto dependente de tubulina durante a migração de fagócitos e ativa a NADPH-oxidase neutrofílica. Referências relacionadas: PMID:15331440
• Extracelularmente, S100A9 exerce atividades pró-inflamatórias, antimicrobianas, sequestradoras de oxidantes e indutoras de apoptose. Referências relacionadas: PMID:21382888
• Ele atua como um alarmina, ligando-se a TLR4 e AGER, que ativam as vias de sinalização MAP-cinase e NF-kappa-B, amplificando a cascata pró-inflamatória. Referências relacionadas: PMID:17767165 PMID:18403730 PMID:19402754
• S100A9 se localiza no citoplasma, associado ao citoesqueleto, pode ser secretado e também se localiza na membrana celular.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação, metilação e fosforilação, que regulam suas diversas funções.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para citometria de fluxo intracelular, fixe e permeabilize as células de acordo com protocolos padrão (por exemplo, usando um kit de fixação/permeabilização) para permitir que o anticorpo acesse o S100A9 citoplasmático.
• Realize a titulação do anticorpo conjugado com para determinar a concentração ideal para o seu tipo específico de célula e condições experimentais.
• Inclua controles positivos apropriados (por exemplo, neutrófilos ou monócitos de rato, que expressam altos níveis de S100A9) e controles negativos (controle de isotipo ou células não estimuladas) no seu ensaio.
• Considere que S100A9 pode formar complexos com S100A8; essa interação pode influenciar a acessibilidade do epítopo, portanto valide se o anticorpo detecta a forma monomérica ou complexada no seu ensaio.
• Este anticorpo foi desenvolvido contra a sequência completa de S100a9 de rato (aminoácidos 1-113), portanto pode apresentar reatividade cruzada com outras espécies se as sequências forem altamente conservadas, mas o fornecedor apenas valida a reatividade em rato. Teste em outras espécies se necessário.

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