Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Rato CD4 para Citometria de Fluxo - P05540

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD4

• O CD4, também conhecido como T4/Leu-3 ou antígeno W3/25, é uma glicoproteína de superfície de células T codificada pelo gene Cd4 em ratos.
• Funciona como um correceptor de membrana integral para moléculas de MHC de classe II, interagindo com o receptor de células T (TCR) e células apresentadoras para iniciar respostas imunes.
• Após o engajamento do MHC, o CD4 recruta a quinase Src LCK, levando a cascatas de fosforilação que promovem a ativação de células T auxiliares, a produção de linfocinas e a adesão.
• O CD4 é crítico para a diferenciação de células T auxiliares tímicas e também pode desencadear a maturação de monócitos para macrófagos de maneira independente de LCK.
• Além das células T, a expressão de CD4 em macrófagos e células NK influencia a expressão de citocinas e a migração celular.
• A proteína está localizada na membrana celular e apresenta quatro domínios semelhantes à imunoglobulina, com um peso molecular previsto de aproximadamente 51 kDa.
• Modificações pós-traducionais incluem a formação de pontes dissulfeto, glicosilação e palmitoilação, que são essenciais para sua estrutura e função.
• O CD4 é um marcador chave para a identificação de subconjuntos de células imunes e um receptor primário para a entrada do HIV em humanos (insights estruturais disponíveis através da palavra-chave de estrutura 3D).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para citometria de fluxo, titule o anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal para sua população celular específica e configuração experimental.
• Use anticorpos de controle de isotipo apropriados conjugados ao mesmo fluoróforo () para avaliar a ligação inespecífica.
• Inclua um corante de viabilidade para excluir células mortas, que podem causar falsos positivos devido ao aumento da autofluorescência.
• Ao corar, incube no escuro a 4°C para minimizar a modulação do antígeno e o fotobranqueamento do fluoróforo.
• Como o imunógeno compreende os aminoácidos 1-394, o anticorpo provavelmente reconhece um epítopo extracelular, adequado para coloração de superfície sem permeabilização. Verifique o desempenho se a permeabilização for necessária.
• Valide a especificidade do anticorpo usando controles CD4-positivos (por exemplo, esplenócitos de rato ou timócitos) e CD4-negativos.

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