Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD4 de Rato para Citometria de Fluxo - P05540

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD4

• O CD4, também conhecido como antigénio de superfície de células T T4/Leu-3 e antigénio W3/25 em ratos, é uma glicoproteína de superfície celular e um membro da superfamília das imunoglobulinas.
• Funciona como um co-recetor para moléculas de MHC classe II em células apresentadoras de antigénios, facilitando a sinalização do recetor de células T (TCR) ao recrutar a tirosina quinase LCK para o complexo TCR-CD3.
• Essencial para o desenvolvimento tímico das células T auxiliares e desencadeia a diferenciação de monócitos em macrófagos maduros.
• Em macrófagos e células natural killer (NK), o CD4 contribui para a diferenciação, ativação, expressão de citocinas e migração celular através de vias independentes do TCR/LCK.
• Codificado pelo gene Cd4 em rato (ID do Gene: 24933; ortólogo humano ID do Gene: 920).
• Localizado na membrana celular como uma proteína transmembranar tipo I de passagem única.
• Modificações pós-traducionais incluem formação de ligações dissulfeto, N-glicosilação e palmitoilação, que regulam a sua localização membranar e função.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo é gerado contra uma proteína recombinante que abrange os aminoácidos 1-394 do CD4 de rato, cobrindo a maior parte do domínio extracelular, tornando-o adequado para detetar CD4 de superfície por citometria de fluxo.
• Para experiências de citometria de fluxo, titula o anticorpo para determinar a concentração ótima de coloração para o seu tipo celular, de modo a minimizar a ligação inespecífica e alcançar uma separação clara das populações.
• Utiliza controlos de isotipo apropriados e controlos de fluorescência-menos-um (FMO) ao configurar painéis multicolor, para garantir uma seleção de portões precisa, especialmente com o corante brilhante .
• Espera-se uma expressão significativa de CD4 em células T auxiliares de rato, monócitos, macrófagos e subconjuntos de células NK; valida o desempenho nestas populações utilizando controlos positivos e negativos biologicamente relevantes.
• Por se tratar de um anticorpo monoclonal, a consistência entre lotes é geralmente elevada; no entanto, cada novo lote deve ser validado no seu sistema experimental.

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