Anticorpo monoclonal de coelho contra IFN-gama de rato () para citometria de fluxo - P01581

Especificações e parâmetros essenciais do produto

Contexto biológico: função e localização do IFN-gama

• O IFN-gama é um interferon do tipo II, uma citocina essencial para a imunidade inata e adaptativa contra infecções virais, bacterianas e protozoárias.
• É produzido predominantemente por linfócitos T ativados e células natural killer (NK).
• A sinalização por meio do receptor de IFN-gama (IFNGR1/IFNGR2) ativa a via JAK-STAT, levando à transcrição de genes estimulados por interferon.
• Desempenha um papel fundamental na apresentação de antígenos ao induzir subunidades do imunoproteassoma e aumentar a expressão das moléculas de MHC de classe I e II na superfície celular.
• Está envolvido na regulação da quiescência e diferenciação das células-tronco hematopoiéticas em condições homeostáticas.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação e formação de piroglutamato N-terminal (ácido pirrolidona carboxílico).
• É uma proteína secretada, liberada principalmente por células imunes ativadas.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para citometria de fluxo intracelular, as etapas de fixação e permeabilização devem ser otimizadas para o seu tipo específico de célula. Protocolos padrão que utilizam fixação com paraformaldeído e permeabilização à base de saponina podem ser adequados.
• Inclua controles de células T de rato não estimuladas e estimuladas para confirmar a especificidade do anticorpo. A estimulação de esplenócitos de rato com PMA/ionomicina é um controle positivo comum.
• O conjugado é excitado por lasers de 633-647 nm e emite no canal do vermelho distante (por exemplo, canal APC). Certifique-se de utilizar configurações de compensação adequadas.
• O imunógeno abrange os aminoácidos 20-156, correspondentes à proteína IFN-gama madura, sugerindo que o anticorpo reconhece a forma natural secretada.
• Titule a concentração do anticorpo para obter uma coloração ideal e um background mínimo.

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