RABIF anticorpo policlonal de coelho para WB, IF/ICC, ELISA - P47224

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do RABIF

• O RABIF (também conhecido como MSS4, RASGFR3, RASGRF3) é um fator de troca de nucleotídeos de guanina (GEF) que atua especificamente sobre membros da subfamília SEC4/YPT1/RAB, promovendo a troca de GDP/GTP e a ativação das GTPases Rab.
• Estimula a liberação de GDP de YPT1 (Rab1), RAB3A e RAB10, embora sua atividade seja menos potente nesses alvos em comparação com SEC4; essa atividade de GEF implica o RABIF na regulação de diversas vias de transporte vesicular (PubMed:31540829). Referências relacionadas: PMID:31540829
• Pode desempenhar um papel geral no transporte vesicular intracelular devido à sua ampla especificidade de substratos Rab.
• É expresso de forma ubíqua nos tecidos, sugerindo uma função celular fundamental no tráfego de membranas.
• Contém um domínio de ligação ao zinco, indicativo de uma coordenação estrutural de metais importante para a estabilidade ou função da proteína.
• Está sujeito à acetilação, uma modificação pós-traducional que pode regular sua atividade ou suas interações.
• A proteína possui uma estrutura 3D conhecida, proporcionando informações sobre seu mecanismo de GEF e o reconhecimento de substratos.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde ao RABIF humano de comprimento total (aa 1-123), que é altamente conservado; a reatividade cruzada com camundongo e rato sugere o reconhecimento de epítopos conservados. Valide a especificidade na espécie e no tipo de amostra relevantes.
• Como anticorpo policlonal, pode detectar várias isoformas ou membros relacionados da família; para aplicações que exigem alta especificidade, considere o uso de peptídeos bloqueadores ou controles de knockdown com siRNA.
• Para WB, espera-se uma banda em torno de 14 kDa; recomenda-se otimizar a diluição do anticorpo e as condições de bloqueio para obter a melhor relação sinal-ruído.
• Este anticorpo é adequado para IF/ICC; certifique-se de utilizar protocolos apropriados de fixação e permeabilização, pois os sinais de localização podem ser afetados pela superexpressão de proteínas marcadas.
• Em ELISA, utilize-o como anticorpo de captura ou detecção; recomenda-se a titulação adequada e o teste de reatividade cruzada contra GEFs estreitamente relacionados.

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