Anticorpo Monoclonal de Coelho RalA para WB, ELISA - P11233

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RalA

• O RalA é uma pequena GTPase multifuncional que interage com efetores a jusante distintos para regular a expressão génica, a migração celular, a proliferação, a transformação oncogénica e o tráfego de membrana. Referências relacionadas: PMID:18756269 PMID:19306925 PMID:20005108
• Atua como um sensor de GTP para a exocitose dependente de GTP de vesículas de núcleo denso e, através do complexo RALA-exocisto, controla a exocitose de jangadas de membrana dependente de integrinas e a sinalização de crescimento. Referências relacionadas: PMID:20005108
• Funciona como um regulador chave da sinalização LPAR1 ao competir com a GRK2 pela ligação ao LPAR1, modulando assim as propriedades de sinalização do recetor.
• Necessário para a proliferação independente de ancoragem de células transformadas. Referências relacionadas: PMID:19306925
• Durante a mitose, localiza-se na fissura de clivagem e no corpo médio, onde suporta a estabilização e alongamento da ponte intracelular e recruta componentes do exocisto via EXOC2. Referências relacionadas: PMID:18756269
• Também no corpo médio, controla a fissão mitocondrial ao recrutar RALBP1, levando à fosforilação e ativação de DNM1L pela ciclina B-CDK1. Referências relacionadas: PMID:21822277
• A localização subcelular inclui a membrana celular, a fissura de clivagem, o corpo médio, o anel do corpo médio e a mitocôndria.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação, prenilação, metilação e fosforilação; pertence à superfamília das pequenas GTPases com um domínio de ligação de nucleótidos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio compreende uma proteína de fusão recombinante que cobre os aminoácidos 120–206 do RalA humano, visando a região terminal C. Este design pode produzir anticorpos que reconhecem o RalA de comprimento total e possivelmente isoformas ou variantes de splicing que contêm esta sequência.
• No Western blot, espera-se uma banda em aproximadamente 24 kDa para o RalA endógeno. Recomendamos otimizar as condições de lise e usar controlos apropriados (por exemplo, lisados com sobrexpressão de RalA) para confirmar a especificidade, especialmente dada a possível co-migração com outras pequenas GTPases.
• O anticorpo é reativo ao RalA humano e de macaco; a reatividade cruzada com outras espécies deve ser verificada experimentalmente, se necessário.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser empregue como reagente de captura ou deteção; titule e valide com a proteína RalA recombinante para estabelecer a sensibilidade do ensaio e o intervalo linear.
• Como um anticorpo monoclonal de coelho, oferece alta especificidade e consistência de lote para lote, sendo adequado para ensaios quantitativos.

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