RBX1 pAb de coelho para WB e ELISA - P62877

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do RBX1

• RBX1 (também conhecido como ROC1, RNF75) é um componente central de múltiplos complexos de ligase E3 de ubiquitina cullina-RING (CRL), que direcionam proteínas para ubiquitinação e degradação proteassômica, regulando a progressão do ciclo celular, a transdução de sinais e a transcrição.
  Referências relacionadas: PMID:10230407, PMID:10579999, PMID:11961546
• Juntamente com ARIH1, os complexos CRL mediam a ubiquitinação sequencial, na qual ARIH1 adiciona a primeira ubiquitina aos substratos.
  Referências relacionadas: PMID:27565346
• Como parte do complexo CSA, RBX1 ubiquitina a RNA polimerase II (POLR2A) na Lys-1268, uma etapa fundamental no reparo por excisão de nucleotídeos acoplado à transcrição (TC-NER).
  Referências relacionadas: PMID:32355176, PMID:34526721
• RBX1 é um componente central do complexo Cul7-RING(FBXW8), que direciona proteínas específicas para degradação.
  Referências relacionadas: PMID:35982156
• Também forma um complexo de ligase Cul9-RING que monoubiquitina p53/TP53.
  Referências relacionadas: PMID:38605244
• RBX1 recruta a enzima E2 CDC34 para o complexo CRL e pode estimular sua autoubiquitinação; também promove a neddilação das cullinas por meio de UBE2M.
• Está envolvido na ubiquitinação de KEAP1, ENC1 e KLHL41 e, em conjunto com ATF2 e CUL3, promove a degradação de KAT5, modulando a ativação de ATM.
• A proteína está localizada tanto no citoplasma quanto no núcleo, é amplamente expressa e contém um domínio dedo de zinco essencial para sua atividade de ligase E3; está sujeita a acetilação e fosforilação.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 1-100 do RBX1 humano (NP_055063.1). Para WB, considere o uso de lisados celulares totais de linhagens celulares humanas, de camundongo ou de rato; o peso molecular previsto é de aproximadamente 12 kDa. Utilize condições adequadas de bloqueio e detecção.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser utilizado para detectar RBX1 em ensaios com soro ou proteína purificada; valide com controles positivos e negativos apropriados.
• Considerando o papel central do RBX1 na ubiquitinação, considere o uso de inibidores do proteassoma (por exemplo, MG132) para estabilizar substratos ubiquitinados em seu desenho experimental.
• Otimize a diluição do anticorpo para cada aplicação e tipo de amostra; para a reatividade cruzada com camundongo e rato, verifique a homologia específica da sequência entre espécies na região do imunógeno.

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