Anticorpo Policlonal RING1A (Coelho) para WB, IHC-P, ELISA - Q06587

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da RING1A

• A RING1A, também conhecida como RNF1 ou proteína do complexo Polycomb RING1, é uma E3 ubiquitina-proteína ligase que desempenha um papel central na modificação de histonas e na regulação gênica epigenética.
• Ela constitui uma das ligases E3 que medeiam a monoubiquitinação da histona H2A na Lis-119, uma modificação que serve como uma marca específica para repressão transcricional e é essencial para a inativação do cromossomo X em mamíferos fêmeas.
• A RING1A é um componente central do complexo repressivo Polycomb 1 (PRC1), que mantém o estado silenciado de reguladores-chave do desenvolvimento, como os genes Hox, por meio de remodelação da cromatina e mudanças hereditárias na expressão gênica.
• Comparada ao seu parálogo RNF2/RING2, a RING1A exibe atividade intrínseca de ligase E3 mais fraca e acredita-se que funcione principalmente como um modulador ou fator acessório para a ubiquitinação de histonas mediada por RNF2/RING2.
• Existem múltiplos isoformas devido ao splicing alternativo, e a proteína contém um domínio de dedo de zinco do tipo RING essencial para sua função de ligase de ubiquitina, juntamente com motivos para ligação de metal e regulação da cromatina.
• A RING1A localiza-se no núcleo e é enriquecida em speckles nucleares, consistente com seu papel na regulação da transcrição e organização da cromatina.
• Ela está sujeita a fosforilação e foi identificada em estudos de proteômica, indicando um controle pós-traducional dinâmico de sua atividade dentro do núcleo.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio corresponde aos aminoácidos 207-406, uma região que abrange parte do domínio C-terminal; portanto, o anticorpo pode reconhecer a RING1A de comprimento total e potencialmente algumas variantes de splicing, mas a validação em amostras relevantes é recomendada.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda em aproximadamente 42 kDa; considere usar extratos nucleares ou lisados de células inteiras de linhagens celulares humanas, de camundongo ou rato como controles positivos, e otimize a diluição do anticorpo primário.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), valide o anticorpo em cortes de tecido embebidos em parafina conhecidos por expressar RING1A, aplicando métodos apropriados de recuperação de antígeno e testando uma faixa de diluições para obter coloração nuclear específica.
• No ELISA, a natureza policlonal permite uso flexível como reagente de captura ou detecção; no entanto, o emparelhamento com um anticorpo monoclonal pode melhorar a especificidade em formatos sanduíche – a variabilidade entre lotes deve ser avaliada durante o desenvolvimento do ensaio.

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