Anticorpo Monoclonal de Coelho ROCK2 para WB, IHC-P, ELISA - O75116

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ROCK2

• ROCK2 (proteína quinase associada a Rho 2, também conhecida como ROCK-II ou p164 ROCK-2) é uma serina/treonina-proteína quinase codificada pelo gene ROCK2.
• É um regulador chave do citoesqueleto de actina e da polaridade celular, envolvido na contração do músculo liso, formação de fibras de estresse e adesões focais, retração de neuritos, adesão celular e motilidade.
• A ROCK2 fosforila uma variedade de substratos incluindo ADD1, BRCA2, CNN1, EZR, DPYSL2, EP300, MSN, MYL9/MLC2, NPM1, RDX, PPP1R12A, VIM, SORL1 e IRF4, mediando diversos processos celulares.
• A proteína atua como um regulador negativo da ativação endotelial angiogênica induzida por VEGF e regula positivamente MAPK1/3 e p90RSK durante a diferenciação miogênica.
• Desempenha papéis na duplicação do centrossomo, inibição da diferenciação terminal de queratinócitos, e pode regular o fechamento da pálpebra e da parede corporal ventral via organização da actomiosina.
• No hipocampo, a ROCK2 é crítica para a regulação das propriedades das espinhas dendríticas e sinápticas, e também contribui para o ritmo circadiano da sensibilidade ao Ca²⁺ dos miofilamentos aórticos e da contratilidade vascular.
• Subcelularmente, a ROCK2 localiza-se no citoplasma, membrana celular, núcleo, citoesqueleto, centro organizador de microtúbulos e centrossomo.
• A proteína contém domínios de coiled-coil e dedo de zinco, e seu peso molecular é de aproximadamente 160.9 kDa; é expressa no cérebro e classificada como fosfoproteína.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot, considere usar um gel de SDS-PAGE com baixa porcentagem (ex.: 6-8%) para separar efetivamente a grande proteína ROCK2 de ~161 kDa, e garanta tempo de transferência adequado para membranas de alto peso molecular.
• Na imuno-histoquímica (parafina), as condições de recuperação antigênica podem precisar de otimização empírica; teste métodos baseados em ácido cítrico ou EDTA dependendo do tipo de tecido.
• Valide o desempenho do anticorpo em lisados de controle positivo de linhagens celulares humanas, de camundongo ou rato conhecidas por expressar ROCK2 (ex.: HeLa, NIH/3T3, ou tecidos cerebrais) antes do uso experimental.
• Protocolos de ELISA podem se beneficiar de experimentos de bloqueio com peptídeo para confirmar especificidade; faça titulação do anticorpo para obter a melhor relação sinal-ruído.

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