Anticorpo Policlonal de Coelho SARS-CoV-2 NSP10 para WB, IP, ELISA - P0DTD1

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NSP10

• O NSP10 é uma proteína não estrutural codificada pelo gene da replicase do SARS-CoV-2 (rep) como parte da poliproteína ORF1ab (Poliproteína Replicase 1ab, P0DTD1). É libertada por clivagem proteolítica da poliproteína.
• O NSP10 desempenha um papel fundamental na transcrição viral ao estimular tanto a atividade exorribonuclease 3'-5' da nsp14 (correção de provas) quanto a atividade 2'-O-metiltransferase da nsp16, garantindo assim a correta metilação do cap do mRNA viral.
  Referências relacionadas: PMID:35944563
• O NSP10 localiza-se predominantemente no citoplasma do hospedeiro e na região perinuclear, onde interage com outras proteínas não estruturais para formar o complexo de replicação-transcrição (RTC).
• Como um cofator crítico, o NSP10 é essencial para o processamento de cap do RNA viral, o que ajuda o vírus a evadir os sensores imunes inatos do hospedeiro, como o IFIT1 e o IFIT3.
• A proteína é altamente conservada entre os coronavírus, tornando-a um alvo potencial para terapêuticas antivirais e um antigénio relevante para o desenvolvimento de anticorpos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio utilizado para este anticorpo é uma proteína recombinante que cobre os aminoácidos 1–139 do NSP10 do SARS-CoV-2 (YP_009725306.1). Espera-se que este constructo de comprimento total gere anticorpos que reconhecem múltiplos epítopos, oferecendo uma deteção robusta em ensaios.
• Os anticorpos policlonais podem apresentar ligeira variabilidade de lote para lote; é aconselhável titular e validar o anticorpo no sistema experimental específico (por exemplo, lisados de células infectadas para WB, IP ou ELISA).
• Para Western blot, considere o uso de controlos positivos apropriados, como lisados de células infectadas com SARS-CoV-2 ou NSP10 sobreexpresso. Note que o NSP10 migra a ~14 kDa, enquanto os 794 kDa relatados refletem a poliproteína replicase de comprimento total.
• Na imunoprecipitação, o anticorpo pode co-imunoprecipitar parceiros de interação como a nsp14 e a nsp16; valide cuidadosamente as condições de co-IP.
• Para ELISA, considere o uso da proteína NSP10 recombinante como padrão para avaliar a sensibilidade e especificidade do anticorpo antes de testar com amostras clínicas.

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