pAb de coelho contra SARS-CoV-2 NSP6 para WB e ELISA - P0DTD1

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NSP6 do SARS-CoV-2

• A NSP6 é um produto de clivagem da poliproteína replicase 1ab (ORF1ab) codificada pelo SARS-CoV-2, liberada pela protease principal viral.
• Desempenha um papel fundamental na formação e manutenção das vesículas de membrana dupla (DMVs), que são as organelas de replicação viral. A NSP6 une as membranas do retículo endoplasmático e se conecta aos gotículas lipídicas, facilitando a biogênese das DMVs. Referências relacionadas: PMID:35551511
• Interage com a TBK1 do hospedeiro sem afetar sua fosforilação, levando à diminuição da fosforilação do IRF3 e à inibição da produção de interferon tipo I, contribuindo assim para a evasão da imunidade inata. Referências relacionadas: PMID:32979938
• Localização subcelular: membrana do retículo endoplasmático do hospedeiro, DMVs e região perinuclear, o que é consistente com seu papel na remodelação de membranas.
• Prevê-se que contenha múltiplas hélices transmembrana, possibilitando a associação com a membrana do RE e as funções de união de membranas.
• Está envolvida na imunoevasão viral e na supressão das respostas imunes inatas do hospedeiro; sendo identificada como um fator chave na replicação e patogenicidade do SARS-CoV-2.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 236-290 da NSP6 (YP_009725302.1), uma região conservada entre os isolados do SARS-CoV-2. Recomenda-se usar lisados de células infectadas ou células transfectadas que expressem NSP6 para a validação.
• Para Western blot, observe que o anticorpo pode detectar tanto a poliproteína replicase de comprimento total (~794 kDa) quanto o produto de NSP6 clivado. Valide os tamanhos das bandas observadas no seu sistema experimental e inclua controles apropriados para confirmar a especificidade.
• Para ELISA, proteína NSP6 recombinante purificada ou lisados virais podem ser usados como antígenos de revestimento. Otimize as concentrações do anticorpo e do antígeno para obter a melhor relação sinal-ruído.
• Sempre faça a titulação do anticorpo para cada aplicação e inclua controles positivos e negativos para garantir resultados confiáveis.

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