Anticorpo pAb de Coelho SARS-CoV-2 ORF3A - P0DTC3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína ORF3A do SARS-CoV-2

• A proteína ORF3a é uma proteína acessória do SARS-CoV-2, também conhecida como Proteína 3a, Proteína U274 ou Proteína X1.
• Desempenha um papel fundamental na saída viral, facilitando o tráfego lisossomal de vírions (PubMed:33157038, PubMed:33422265). Referências relacionadas: PMID:33157038 PMID:33422265
• A ORF3a forma canais iónicos homotetraméricos (viroporinas) nas membranas endossomal e lisossomal, potencialmente induzindo a desacidificação lisossomal para promover a libertação viral segura (PubMed:33157038, PubMed:33422265, PubMed:34158638). Referências relacionadas: PMID:33157038 PMID:33422265 PMID:34158638
• A proteína perturba a autofagia do hospedeiro ao ligar-se à VPS39 nos endossomas tardios, o que bloqueia a fusão autofagossoma-lisossoma e a formação de autolisossomas (PubMed:33422265). Referências relacionadas: PMID:33422265
• A ORF3a induz reticulofagia dependente de RETREG1/FAM134B ao interagir com HMGB1, melhorando a associação HMGB1-BECN1 e causando stress no RE e respostas pró-inflamatórias (PubMed:35239449). Referências relacionadas: PMID:35239449
• A nível subcelular, a ORF3a localiza-se no vírion, na membrana da célula hospedeira, na membrana do retículo endoplasmático, em formas secretadas, no citoplasma, nos endossomas e nos lisossomas.
• Palavras-chave biológicas principais incluem glicoproteína, interação hospedeiro-vírus, canal iónico, transporte iónico, ativação da autofagia do hospedeiro e atividade de viroporina.
• A proteína tem um peso molecular calculado de ~31,1 kDa (UniProt), consistente com os 31 kDa observados esperados para este anticorpo.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 100-200 da proteína ORF3a; os epítopos de ligação do anticorpo podem estar concentrados nesta região, o que deve ser considerado ao conceber experiências ou interpretar resultados.
• Para o Western blotting, a banda esperada para a ORF3a é cerca de 31 kDa; valide a especificidade usando lisados de células infetadas com SARS-CoV-2 ou sistemas com superexpressão de ORF3a.
• Em aplicações ELISA, confirme as condições de revestimento ótimas e a diluição do anticorpo usando a proteína recombinante ORF3a ou controlos positivos definidos.
• Como um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes pode variar; é aconselhável qualificar cada novo lote na aplicação pretendida antes do uso em grande escala.
• O anticorpo é enviado em gelo; upon receipt, alíquota e armazene a -20°C (ou conforme recomendado pelo fabricante) para manter a estabilidade.

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