SH2B1 Coelho pAb para IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9NRF2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SH2B1

• A proteína adaptadora SH2B1 (SH2B1, também conhecida como PSM) é uma proteína adaptadora intracelular que carece de atividade enzimática intrínseca, mas contém domínios SH2 e PH, permitindo o recrutamento para receptores e adaptadores contendo fosfotirosina.
• Funciona como um mediador de sinalização crítico para múltiplas quinases de receptor de tirosina (RTKs) e receptores de citocinas associados à quinase Janus (JAK), incluindo insulina, fator de crescimento semelhante à insulina 1 (IGF1), fator de crescimento nervoso (NGF), fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF), fator neurotrófico derivado da linhagem de células gliais (GDNF), fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGF) e fatores de crescimento de fibroblastos (FGFs).
• Na sinalização do hormônio de crescimento (GH) e leptina, o SH2B1 liga-se ao JAK2 autofosforilado e aumenta a atividade da quinase JAK2, promovendo vias a jusante, como PI3K-Akt, via fosforilação de IRS1/2.
• Issoformas do SH2B1, geradas por splicing alternativo, podem modular diferencialmente a sinalização; por exemplo, podem exibir papéis distintos na mitogênese induzida por IGF1 e PDGF.
• A nível subcelular, o SH2B1 localiza-se no citoplasma, membrana celular e núcleo, consistente com seu papel dinâmico na transdução de sinais.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação em resíduos de tirosina e serina/treonina (por exemplo, por JAK2), que criam locais de ancoragem para outras proteínas de sinalização, e metilação.
• O SH2B1 é amplamente expresso nos tecidos, com os níveis mais altos detectados no músculo esquelético e ovário, refletindo suas funções regulatórias amplas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para IHC-P, considere otimizar a recuperação de antígeno e a diluição do anticorpo primário usando tecidos de controle positivo, como músculo esquelético ou ovário, onde o SH2B1 é altamente expresso.
• Para IF/ICC, as condições de fixação e permeabilização devem ser determinadas empiricamente; o anticorpo pode detectar pools de membrana, citoplasmáticos e/ou nucleares, dependendo do tipo de célula e estímulo.
• Dada a natureza policlonal deste anticorpo, é aconselhável realizar um experimento de titulação e validar a especificidade usando controles de knockdown ou knockout para contabilizar a variabilidade potencial entre lotes.
• O ELISA pode ser usado para detectar SH2B1 endógeno; no entanto, padrões apropriados e protocolos de preparação de amostras devem ser otimizados para o formato de ensaio específico.
• Prevê-se que este anticorpo reaja cruzadamente com SH2B1 de camundongo e rato com base na homologia de sequência, mas a validação experimental nestas espécies é recomendada.

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