Anticorpo Monoclonal de Coelho Smac/Diablo para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9NR28

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Smac/Diablo

• O gene DIABLO (SMAC) codifica uma proteína mitocondrial que promove a apoptose ativando caspases na via citocromo c/Apaf-1/caspase-9. Oposta às proteínas inibidoras de apoptose (IAPs), incluindo BIRC6/BRUCE, caspase-9 e XIAP/BIRC4. Referências relacionadas: PMID:15200957 PMID:36758104 PMID:36758105
• Smac/Diablo atenua a estabilidade e a atividade de inibição da apoptose da XIAP/BIRC4, promovendo sua ubiquitinação e degradação proteassomal, e interrompe a interação XIAP/caspase-9 para facilitar a ativação da caspase-3.
• O splicing alternativo produz múltiplas isoformas; a isoforma 3 é expressa de forma ubíqua e pode ser defeituosa na regulação negativa da XIAP.
• Subcelularmente, o Smac/Diablo localiza-se na mitocôndria e é liberado para o citosol após estímulos apoptóticos.
• A proteína é expressa de forma ubíqua com os níveis mais altos nos testículos; também alta no coração, fígado, rim, baço, próstata e ovário; baixa no cérebro, pulmão, timo e leucócitos de sangue periférico.
• Palavras-chave: Estrutura 3D, Splicing alternativo, Apoptose, Citoplasma, Surdez, Sequenciamento direto de proteínas, Variante de doença, Mitocondria, Surdez não sindrômica, Conjugação Ubl.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno recombinante (aa 56-239) corresponde à região madura processada esperada após o clivagem mitocondrial; o anticorpo pode detectar tanto a forma completa (27 kDa) quanto as formas processadas (21/22 kDa).
• Para Western blot, considere carregar lisados de controle positivo apropriados de tecidos humanos, de camundongo ou de rato, e otimize as condições redutoras para resolver isoformas distintas.
• Em IHC-P e IF/ICC, a recuperação de antígeno (por exemplo, tampão citrato pH 6,0) e a permeabilização devem ser otimizadas; padrões de coloração citoplasmática/mitocondrial podem exigir validação cuidadosa.
• Aplicações de ELISA exigem titulação individual de reagentes de captura e detecção; o anticorpo pode ser avaliado como parte de um par correspondente após testes funcionais.

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