Anticorpo Monoclonal de Coelho Smad5 para WB, IP, ELISA - Q99717

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Smad5

• SMAD5 (Homólogo 5 de "Mothers against decapentaplegic"), também conhecido como JV5-1 ou MADH5, é um membro da família de fatores de transcrição SMAD que transduzem sinais de ligantes da superfamília TGF‑β.
• Após estímulo por proteína morfogenética óssea (BMP), o SMAD5 é fosforilado pelos receptores BMP do tipo I, promovendo sua associação com o SMAD4. O complexo resultante transloca para o núcleo e se liga a Elementos de Ligação Smad (SBEs) para regular a expressão gênica. Referências relacionadas: PMID:9442019 PMID:33510867
• O SMAD5 é essencial para o desenvolvimento embrionário, diferenciação celular, angiogênese e homeostase tecidual. Referências relacionadas: PMID:12064918 PMID:16516194
• Em seu estado não fosforilado, o SMAD5 exerce um papel citoplasmático no metabolismo energético, aumentando a respiração mitocondrial e a glicólise através de uma interação com a hexoquinase 1 (HK1). Referências relacionadas: PMID:28675158
• Estudos de localização subcelular revelam SMAD5 no citoplasma, núcleo e mitocôndria, refletindo suas diversas funções de sinalização e metabólicas.
• O SMAD5 é expresso de forma ubíqua em tecidos humanos.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação e acetilação; também contém um domínio de ligação a zinco característico das proteínas SMAD.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio foi um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 200–300 do SMAD5 humano. O anticorpo monoclonal de coelho resultante é esperado reconhecer a proteína SMAD5 total; pode não distinguir entre as formas fosforilada e não fosforilada, a menos que o epítopo fosfo esteja dentro desta região.
• Para Western blot, espera-se uma banda em aproximadamente 52 kDa. Considere tratar células com ligantes BMP (ex.: BMP2/BMP4) para visualizar deslocamentos do SMAD5 fosforilado ou para verificar a ativação da via.
• Este anticorpo é adequado para imunoprecipitação de SMAD5 endógeno a partir de lisados humanos e de camundongo; recomendamos otimizar as condições de lise e lavagem para estudos de co-imunoprecipitação.
• Em ELISA, o anticorpo pode ser usado para detecção de SMAD5 em formatos de ELISA baseados em peptídeo ou sanduíche. Valide com proteína SMAD5 recombinante ou lisados celulares.
• Como com qualquer anticorpo, valide a especificidade no seu sistema experimental usando controles positivos (ex.: HeLa, HEK293 tratadas com BMP) e negativos (ex.: knockdown mediado por siRNA) apropriados.

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