Anticorpo Monoclonal de Coelho SNX4 para WB, IP, ELISA - O95219

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SNX4

• O SNX4, ou sorting nexin-4, é um membro da família de proteínas sorting nexin, caracterizadas pela presença de um domínio de homologia de phox (PX) que facilita a ligação a fosfoinositídeos e a associação com membranas.
• O SNX4 desempenha um papel central na regulação da endocitose e em múltiplas etapas do tráfego intracelular (PubMed:12668730, PubMed:17994011, PubMed:32513819). Referências relacionadas: PMID:12668730 PMID:17994011 PMID:32513819
• Está especificamente envolvido na reciclagem do receptor de transferrina endocitado, prevenindo sua degradação lisossomal e, assim, mantendo a homeostase de ferro (PubMed:17994011). Referências relacionadas: PMID:17994011
• O SNX4 contribui para a biogênese de autofagossomos mediando o tráfego e a reciclagem da scramblase de fosfolipídios ATG9A, uma proteína chave necessária para a autofagia (PubMed:32513819, PubMed:33468622). Referências relacionadas: PMID:32513819 PMID:33468622
• Subcelularmente, o SNX4 localiza-se predominantemente na face citoplasmática das membranas de endossomos precoces, onde participa da classificação de carga e formação de vesículas.
• Modificações pós-traducionais do SNX4 incluem acetilação e fosforilação, que podem regular sua atividade, localização ou interações proteicas.
• O gene SNX4 sofre splicing alternativo, dando origem a múltiplas variantes de transcritos que podem codificar isoformas proteicas distintas com funções potencialmente diferentes.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado para gerar este anticorpo corresponde a um fragmento recombinante que cobre os aminoácidos 321–400 do SNX4 humano, próximo à região C-terminal, o que pode permitir o reconhecimento de conformações proteicas nativas e desnaturadas.
• Para Western blot, prepare lisados de células inteiras usando o tampão de amostra RIPA ou SDS padrão; uma banda proteica próxima a 52 kDa é esperada em condições redutoras. Considere incluir um controle positivo, como extratos de células HeLa ou HEK293T, que expressam SNX4 endógeno.
• Em ensaios de imunoprecipitação, otimize a razão anticorpo-lisado e use um sistema de contas compatível (por exemplo, agarose proteína A/G) para IgGs de coelho. Valide a recuperação por Western blot com um anticorpo anti-SNX4 diferente.
• Para aplicações de ELISA, teste uma faixa de concentrações de antígeno de revestimento e diluições de anticorpo usando a proteína ou peptídeo SNX4 recombinante. Certifique-se de que o epítopo esteja acessível no formato de revestimento.
• O anticorpo apresenta reatividade cruzada com SNX4 de camundongo; realize a validação inicial em sistemas modelo humanos e de camundongo para confirmar o desempenho específico da espécie.
• Como o SNX4 funciona em vias dinâmicas de tráfego de membrana, as condições de fixação e permeabilização para imunofluorescência podem exigir otimização, embora esta aplicação não tenha sido especificada para este produto.

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