Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Symmetric DiMethyl-Histone H3-R2 (Q16695/P68431) para WB, IHC, IF, ELISA, ChIP-seq

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

A histona H3 é uma das proteínas histônicas centrais, que junto com H2A, H2B e H4, forma a partícula central do nucleossomo. Os nucleossomos envolvem e compactam o DNA em cromatina, desempenhando um papel central na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

Tanto a histona H3.1 (codificada por múltiplos genes, incluindo H3C1, H3C2, etc.) quanto a H3.1t (codificada por H3-4) são expressas em células humanas, com a H3.1t predominantemente encontrada em células testiculares. Referências relacionadas: UniProt Q16695

As histonas sofrem uma vasta gama de modificações pós-traducionais (PTMs), incluindo acetilação, metilação, fosforilação, citrulinização e mais, coletivamente conhecidas como "código das histonas". Essas modificações regulam a estrutura da cromatina e a expressão gênica. Entre elas, a dimetilação simétrica de resíduos de arginina é catalisada por proteinas arginina metiltransferases, como a PRMT5. Por exemplo, a dimetilação simétrica na arginina 9 da histona H3 (H3R9me2s) foi relatada. Este anticorpo reconhece especificamente a arginina 2 simetricamente dimetilada (H3R2me2s), uma modificação que pode desempenhar um papel na regulação epigenética. Referências relacionadas: UniProt Q16695

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio é um peptídeo sintético simetricamente dimetilado em torno de R2, garantindo alta especificidade para a modificação H3R2me2s. Ao realizar Western blotting, extratos nucleares enriquecidos em histonas ou histonas extraídas com ácido podem melhorar a detecção.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), as condições de recuperação de antígeno e permeabilização devem ser otimizadas para cada tipo de tecido ou célula.
• Em experimentos de ChIP-seq, considere incluir reações de controle, como DNA de entrada, controle de IgG e possivelmente competição com peptídeo para confirmar a especificidade de ligação. Controles de "spike-in" podem ser úteis para normalização quantitativa.
• Abordagens baseadas em ELISA podem ser usadas para detecção quantitativa dos níveis de H3R2me2s em lisados celulares ou preparações de histonas purificadas; garanta uma carga proteica consistente e considere usar um anticorpo pan-H3 para normalização.
• A reatividade cruzada é relatada para humano, rato, rato e outras espécies (amplo alcance previsto). No entanto, a validação em seu sistema de amostra específico é recomendada.

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