Anticorpo de Coelho pAb para Histona H3-R26 Simétrica DiMetil (Q16695/P68431) para WB, IF/ICC, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

A histona H3 é um componente central do nucleossomo, a unidade repetitiva fundamental da cromatina. Os nucleossomos envolvem e compactam o DNA, restringindo o acesso ao material genético e, assim, regulando processos essenciais como transcrição, reparo de DNA, replicação de DNA e estabilidade cromossômica. A regulação dinâmica da acessibilidade do DNA é alcançada através de uma complexa variedade de modificações pós-traducionais (PTMs) nas histonas, frequentemente referidas como o "código das histonas", bem como remodelação do nucleossomo. Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

A histona H3 localiza-se predominantemente no núcleo e associa-se aos cromossomos. É expressa em várias isoformas; por exemplo, a variante H3.1t (codificada por H3-4) mostra expressão específica do testículo, enquanto a histona H3.1 canônica está presente de forma ubíqua em células somáticas. Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

A cauda N-terminal da histona H3 está sujeita a extensas PTMs, incluindo acetilação, metilação (lisina e arginina), fosforilação, citrulinização e outras. Estados de metilação específicos (por exemplo, dimetilarginina simétrica/assimétrica, mono-, di- ou trimetillisina) em resíduos definidos servem como locais de ancoragem para proteínas efetoras, influenciando a estrutura da cromatina e os resultados da expressão gênica. A metilação de arginina, como a dimetilação simétrica mediada pela PRMT5, tem sido implicada na regulação transcricional e organização do genoma. Referências relacionadas: PMID:17898714, PMID:18077460, PMID:19608861

A alta conservação evolutiva da histona H3 entre as espécies sustenta a ampla reatividade cruzada de anticorpos gerados contra sequências humanas, tornando-os ferramentas valiosas para estudar a biologia da cromatina em múltiplos organismos modelo. Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi gerado usando um peptídeo sintético dimetilado simétrico englobando a arginina 26 (R26) da histona H3 humana. Espera-se que reconheça especificamente a marca de dimetilação simétrica nesta posição.
• Para Western blot (WB), uma banda de aproximadamente 15 kDa é tipicamente observada. Considere usar extratos nucleares ou histonas extraídas com ácido para enriquecer o alvo.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), garanta protocolos apropriados de fixação e permeabilização celular para permitir o acesso do anticorpo à cromatina nuclear. Um controle positivo com estados de modificação H3R26me2s conhecidos pode auxiliar na interpretação.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado para detecção direta ou em formato sanduíche. Valide o ensaio com o peptídeo imunogênico e controles apropriados.
• Como o imunógeno é um peptídeo, a pré-adsorção com o peptídeo não metilado ou dimetilado assimétrico pode ajudar a confirmar a especificidade, embora isso deva ser validado no sistema de amostra relevante.
• A reatividade cruzada amplamente prevista sugere utilidade em humano, rato, rato e potencialmente outras espécies; no entanto, é aconselhável verificar o desempenho na espécie específica de interesse.

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