Anticorpo pAb de Coelho Anti-DiMetil Simétrico-Histona H3-R8 (Q16695/P68431) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA, ChIP-seq

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Histona H3.1t / Função e Localização da Histona H3.1

As variantes da histona H3 (incluindo H3.1t codificada por H3-4/HIST3H3 e H3.1 codificada por múltiplos clusters genéticos como H3C1-H3C12) são componentes centrais do nucleossoma. Os nucleossomas enrolam e compactam o ADN em cromatina, limitando a acessibilidade do ADN e desempenhando um papel central na regulação da transcrição, reparo do ADN, replicação do ADN e estabilidade cromossómica.

Referências relacionadas: UniProt P68431

• Estas histonas estão sujeitas a um conjunto complexo de modificações pós-traducionais (PTMs), coletivamente denominadas código de histonas, que regulam a dinâmica da cromatina e a expressão génica. Entre estas, a dimetilação simétrica da arginina na posição 8 (R8) na histona H3 madura (correspondente a Arg9 na sequência UniProt) é catalisada pela proteína arginina metiltransferase 5 (PRMT5). Esta modificação está associada à repressão transcricional e à formação de heterocromatina.

Referências relacionadas: UniProt Q16695

• A histona H3.1t (UniProt Q16695) é uma variante específica do testículo expressa principalmente em células testiculares, enquanto H3.1 (UniProt P68431) representa as formas somáticas canónicas.
• Localização subcelular: Ambas as variantes localizam-se no núcleo e nos cromossomas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Western Blot (WB): Espere uma banda em aproximadamente 15 kDa. Use controlos positivos e negativos apropriados (por exemplo, células não tratadas vs. células tratadas com inibidor de PRMT5) para confirmar a especificidade da dimetilação simétrica. Considere ensaios de competição com peptídeos para validar a ligação do anticorpo ao epítopo R8me2s.
• Imuno-histoquímica (IHC-P) e Imunofluorescência (IF/ICC): Otimize as etapas de fixação e permeabilização, pois a acessibilidade do epítopo pode variar. Como a histona H3 é nuclear, certifique-se do padrão de coloração nuclear e compare com a coloração total de histona H3 ou com a contracoloração DAPI.
• ELISA: Este anticorpo pode ser usado para ELISA direto ou indireto para quantificar níveis de dimetilação simétrica. Titule a concentração do anticorpo e inclua agentes de bloqueio apropriados.
• ChIP-seq: Devido à alta abundância da histona H3, otimize a reticulação e o cisalhamento da cromatina. Use a quantidade mínima de material de entrada e valide a eficiência do ChIP com loci genómicos positivos e negativos (por exemplo, regiões heterocromáticas vs. eucromáticas).
• Dica geral: Inclua sempre um controlo de peptídeo não modificado para distinguir o sinal específico da modificação.

CamelBio: A Sua Ponte de Abastecimento Tudo-em-Um

A CamelBio oferece aos fabricantes de diagnóstico, laboratórios e institutos de investigação uma via de procurement simplificada para matérias-primas de IVD, do conceito à clínica. Este anticorpo anti-dimetil simétrico-histona H3-R8, que visa uma marca epigenética crítica, faz parte do nosso portfólio abrangente de anticorpos metilados e reagentes de modificação de histonas. Além de anticorpos individuais, fornecemos pares de anticorpos validados, anticorpos monoclonais e policlonais otimizados, reagentes auxiliares a granel e ajudamos no abastecimento de matérias-primas de alvos raros para acelerar o desenvolvimento dos seus ensaios de IVD e programas de investigação. Parceire connosco para simplificar a sua cadeia de abastecimento e avançar os seus projetos de diagnóstico.