Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Simétrico DiMetil-Histona H3-R8 (Q16695/P68431) para WB, ELISA, ChIP

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

A histona H3 é um componente central do nucleossomo, que envolve e compacta o DNA em cromatina, limitando assim a acessibilidade do DNA às maquinarias celulares. As histonas desempenham um papel central na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. A acessibilidade do DNA é regulada por um conjunto complexo de modificações pós-traducionais (PTMs) das histonas, também conhecido como código de histonas, e pelo remodelamento do nucleossomo. Referências relacionadas: UniProtKB: Q16695, UniProtKB: P68431

A histona H3.1 canônica (codificada por múltiplos genes como HIST1H3A-J) é expressa de forma ubíqua, enquanto a variante específica de testículo H3.1t (codificada por H3-4/HIST3H3) é encontrada principalmente em células testiculares. Este anticorpo tem como alvo a dimetilação simétrica na arginina 8 (R8) da histona H3, uma modificação catalisada pela proteína arginina metiltransferase 5 (PRMT5). A dimetilação simétrica em H3R8 tem sido implicada na repressão transcricional e no remodelamento da cromatina, contribuindo para a regulação dinâmica da expressão gênica. Referências relacionadas: UniProtKB: Q16695, UniProtKB: P68431

A modificação ocorre na cauda N-terminal da histona H3, uma região rica em PTMs regulatórias, incluindo acetilação, metilação, fosforilação e outras. A interação dessas marcas governa a estrutura e função da cromatina, tornando anticorpos específicos para sítio, como este anti-simétrico dimetil-H3R8, inestimáveis para a pesquisa epigenética. Referências relacionadas: UniProtKB: Q16695, UniProtKB: P68431

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético simetricamente dimetilado em torno do R8 da histona H3 humana, projetado para reconhecer especificamente a marca de dimetilação simétrica. Ao usar este anticorpo em western blot (WB), considere que o peso molecular previsto da histona H3 é de aproximadamente 15 kDa. Garanta uma extração nuclear completa para uma detecção ideal.
• Para ELISA, o recobrimento direto do peptídeo sintético ou extratos de nucleossomos pode ser usado para validar a ligação do anticorpo. Sempre inclua peptídeos de controle apropriados (não modificados, assimetricamente dimetilados ou em outros estados de metilação) para confirmar a especificidade.
• Na imunoprecipitação da cromatina (ChIP), este anticorpo pode ser adequado para o enriquecimento de regiões genômicas associadas à H3R8 simetricamente dimetilada. As condições de reticulação e sonicação devem ser otimizadas para seu tipo celular específico e loci alvo.
• Devido à ampla reatividade cruzada prevista (humano, camundongo, rato e outros), é aconselhável validar o anticorpo no sistema de amostra relevante antes de experimentos em larga escala. Variações de sequência específicas da espécie próximas ao R8 podem influenciar a afinidade de ligação; consulte a sequência específica da histona H3 para o organismo de seu interesse.
• Como com qualquer anticorpo específico para modificação, pode ocorrer variabilidade entre lotes. Sempre faça titulação do anticorpo para determinar a diluição de trabalho ideal para seu ensaio específico.

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